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基本原理
分泌抗體的激活b細胞與骨髓瘤細胞融合,才能生成具有親體細胞兩方面特性即既可產生抗體又可在體外無限繁殖的雜交瘤細胞,因此,細胞融合是單克隆抗體制備的中心環節。細胞融合的方法多采用化學助融法,zui常用的化學助融劑為聚乙二醇(Polyethylene glycol, PEG),分子量100-4000的PEG助融效果,對細胞的毒性相對小。此外,還可利用電融合等物理方法,在親本細胞的情況西很有適宜采用。本節介紹化學融合方法。抗體分泌細胞是由免疫動物(小鼠或大鼠)的脾臟或淋巴結制備,與骨髓瘤細胞混合,并用PEG使之融合。5-15天后,僅雜交瘤開始在選擇培養基(見前)中生長。其后測定雜交瘤分泌的特異抗體,一旦選出合用的陽性細胞,則進行克隆,亞克隆及凍存。
通過細胞融合得到B細胞雜交瘤實驗
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