九九热免费在线观看_毛片女人毛片一级毛片毛片_欧美在线视频一区二区_在线免费看av片_精品视频9999_99视频网站

上海士鋒生物科技有限公司
免費會員

原代細胞培養(yǎng)實驗

時間:2017/3/8閱讀:510
分享:

實驗原理:

原代細胞培養(yǎng)
是將機體內(nèi)的某組織取出,分散成單細胞,在人工條件下培養(yǎng)使其生存并不斷生長、繁殖的方法。借助這種方法可以觀察細胞的分裂繁殖、細胞的接觸抑制、以及細胞的衰老,死亡等生命現(xiàn)象。

實驗內(nèi)容:

動物的選擇:
選擇大約一半足孕時間的胚胎,10-13天齡胚胎含有zui大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細胞,成纖維細胞可從這些細胞衍生獲得。
每組小鼠胚胎1個

實驗材料:
每組的超凈臺中有以下物品:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
4、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
5、細胞計數(shù)板1塊;
6、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
7、酒精燈1臺;

試驗操作步驟:
1)胚胎的分離。適用哺乳動物(倉鼠、小鼠和大鼠)
a.采用認可的方案處死嚙齒動物。
b.立即在無菌超凈臺內(nèi)用70%乙醇擦洗整個動物。
c.用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d.用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無菌的培養(yǎng)皿上。
e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

2)將1-2個胚胎轉(zhuǎn)移至一個小的無菌培養(yǎng)皿中,用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎, 用PBS漂洗。
3)在無菌狀態(tài)下,將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml 的無菌離心筒中, 加入40ml 0.25%的無菌胰蛋白酶,用攪拌棒輕輕攪動 。
4)在溫暖的環(huán)境中或置于37 °C培養(yǎng)箱中輕輕搖動15分鐘。
5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,將含有懸浮細胞的液體轉(zhuǎn)移至一無菌50ml的離心管中,該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,胰蛋白酶。

6)加人新鮮胰蛋白酶溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中,重復(fù)步驟4和5。
7)離心混合的細胞懸液,1200r/rain,5分鐘,棄上清。
8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細胞,按步驟7再次離心。
9)用PBS反復(fù)洗滌細胞直至上清清亮為止。

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 日韩高清一级 | 77成人影视 | 麻豆神马91 | 毛茸茸hdxxxx毛茸茸 | 国产视频1区 | 在线观看播放 | 青青草一区二区 | 国产精品一区久久人人爽 | 91制片一二三专区亚洲 | 国产午夜精品福利 | 亚洲aaa级片 | 亚洲欧美影视 | 福利精品在线观看 | 91在线高清 | 7777精品伊人久久久大香线蕉的 | 亚洲性日韩精品一区二区 | 日韩精品一区二区在线观看 | 青青久久精品 | 91 免费视频| av不卡一区二区三区 | 亚洲精品456在线播放牛牛影院 | 男人网站在线 | 欧美精品1 | 亚洲国产一区二区久久久777 | 少妇和教练在车里激情 | 欧美一二区视频 | 久久久看片 | 久久久综合亚洲91久久98 | 天天弄夜夜操 | 久草成人在线观看 | 亚洲精品国产成人99久久6蜜臀 | fc2一二三区成人性视频 | 成人在线观看一区二区 | 国产精品久久久一区二区 | 999国产一区二区三区四区 | 精品欧美一区二区久久久伦 | 亚洲午夜精品在线观看 | 久久久综合av | 欧美激情视频网站 | 视频国产一区二区 | 久久精品国产亚洲aⅴ瑜伽 91在线精品秘密一区二区 |