Sf9細胞生長條件：27℃、無需CO2、既可懸浮生長也可貼壁生長、培養基SF-900Ⅱ（無血清）。懸浮培養時把細胞在懸浮培養瓶中，要有滾動裝置（若無上述裝置可把培養瓶放在小搖床上<200rpm搖振陪養）。貼壁培養時可把細胞在懸浮培養瓶中直接靜置30-60分鐘即可貼壁，傳代時不用消化，用吸管輕輕吹打即可使細胞脫落下來，一般三天傳一次代。
就我個人經驗，懸浮培養更方便，細胞生長狀態也不錯。尤其對剛復蘇的細胞*行懸浮培養。待細胞長滿或需要細胞時，用吸管把細胞吸入離心管中，1000轉離心5分鐘，然后棄掉上清，用手指將離心管中的細胞彈打均勻，加新培養基，吹打均勻即可分到另外一瓶中。原來瓶中可再加新培養基繼續搖振陪養。
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