染色體顯帶技術(shù)
一、實驗?zāi)康?/div>
1、了解染色體顯帶技術(shù)的發(fā)展與基本知識；
2、掌握染色體C帶技術(shù)。
二、實驗原理
所謂染色體顯帶技術(shù)指借助特殊的處理后，再用染料對染色體進(jìn)行分化染色，使其呈現(xiàn)特定帶紋的一種細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)。如C帶、G帶等。顯帶處理后，染色體上帶紋的數(shù)目、位置、寬窄與染色的深淺具有相對的穩(wěn)定性與一定的種屬特異性。它為不同物種之間的進(jìn)化關(guān)系的研究提供了一個有效手段。C帶是特異的顯示結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)的帶，它專一地顯示著絲粒區(qū)域的結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)。
三、實驗材料
實驗五與實驗二制備的染色體玻片標(biāo)本若干片
四、器具及藥品
顯微鏡，電子天平，恒溫水浴鍋，玻片架，解剖器，染色缸，白瓷板，氫氧化鋇， 化鈉，檸檬酸鈉，吉姆薩，磷酸緩沖液。
五、實驗步驟
㈠BSG法顯示C帶
1、將3-7天的實驗5染色體制片放入0.2mol/l的鹽酸中處理1小時。
2、蒸餾水沖洗后，轉(zhuǎn)入50℃的5％的氫氧化鋇溶液中5-15分鐘。時間由經(jīng)驗得來。
3、同溫蒸餾水沖洗，直至氫氧化鋇沖凈為止，如果沖不凈，可放入0.2mol/l的鹽酸中2秒鐘，再用蒸餾水沖洗干凈，晾干?；蜻B同染色缸放在自來水下沖洗，直至氫氧化鋇溶液沖洗干凈，因鋇遇空氣易形成不溶于水的碳酸鋇膜，污染制片，使染色體無法顯帶。換入蒸餾水，每隔4-5分鐘換水一次，重復(fù)3次左右。
4、轉(zhuǎn)入60℃的2×SSC溶液中恒溫水浴1小時，同溫蒸餾水沖洗，自然干燥。
5、染色
10％Giemsa液（PH＝6.8）扣染1hr，蒸餾水沖洗。
6、鏡檢
7、拍照
?、鍴SG法顯示C帶
1、將3-7天的實驗5染色體制片放入0.2mol/l的鹽酸中處理1小時。
2、蒸餾水沖洗后，轉(zhuǎn)入60℃的2×SSC溶液中恒溫水浴1小時，同溫蒸餾水沖洗，自然干燥。
3、染色
10％Giemsa液（PH＝6.8）扣染1hr，蒸餾水沖洗。
4、鏡檢
5、拍照
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