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人產腸毒素大腸桿菌ST酶聯免疫分析

閱讀:267發布時間:2014-12-18

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人ELISA試劑盒使用目的:

本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中產腸毒素大腸桿菌ST表達。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人產腸毒素大腸桿菌ST表達。用純化的人產腸毒素大腸桿菌ST抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中產腸毒素大腸桿菌ST相結合,經洗滌除去未結合的抗原和其他成分后再與HRP標記的產腸毒素大腸桿菌ST抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中人產腸毒素大腸桿菌ST的存在與否。

人ELISA試劑盒操作步驟

編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,

溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

人ELISA試劑盒保存條件及有效期

1.試劑盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6個月


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