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技術文章

Elisa實驗中牛奶樣本收集方法

閱讀:159發(fā)布時間:2015-5-4

(a)牛奶前處理方法

┅┅ELISA試劑盒取牛奶樣本,3000g以上,10℃離心10min,吸除上層脂肪;

┅┅取5ml去除脂肪牛奶樣本至10ml聚苯乙烯離心管中,加入150ulC液(見配液1)出現(xiàn)沉淀,振蕩15s,再加入150ulD液(見配液2),振蕩1min充分混合;

┅┅3000g以上,15℃離心10min,移取上層液;

┅┅用復溶工作液(見配液6)以等體積稀釋上層液(1份上層液+1份復溶工作液);

┅┅取50ul用于分析。

注:如果離心后仍然渾濁,再重復脫脂過程。   

(b)牛奶前處理方法

┅┅ELISA試劑盒取牛奶樣本,3000g以上,10℃離心10min,吸除上層脂肪;

┅┅取5ml去除脂肪牛奶樣本至10ml聚苯乙烯離心管中,加入250ulC液(見配液1)和250ulD液(見配液2)充分混合,3000g以上,4~12℃離心10min。(如沒有冷凍離心機,請預先將樣本冷卻到8℃再進行離心);

┅┅移取2.2ml上層液(相當于2ml奶樣)至另一個10ml聚苯乙烯離心管中,加入4ml乙酸乙酯上下振蕩10min;

┅┅3000g以上,室溫(20-25℃)離心10min ;

┅┅移取2ml乙酸乙酯上層有機相(相當于1ml奶樣),至10ml干凈的玻璃試管中,于50~60℃水浴氮氣流下吹干;

┅┅ELISA試劑盒加入0.5ml復溶工作液(見配液6),渦動2min溶解干燥的殘留物;

┅┅取50ul用于分析。

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