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體內細胞培養及其操作步驟

閱讀:252發布時間:2015-9-28

1.瘤細胞懸液接種 
elisa試劑盒 (1)無菌選取生長良好(有光澤,淡紅色)瘤組織或對數生長期培養瘤細胞。 
(2)在PBS中將瘤*碎后用勻漿器研磨,經80~100目篩網過濾成細胞懸液。
(3)培養細胞應用PBS洗兩遍。
(4)計數并調整細胞濃度至107~108/ml。
(5)常規消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(0.1ml/部位,>106細胞)。初次接種成功率低,細胞數盡可能多一些。
(6)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,zui后固定為一個相對穩定的時間。
2.腹水瘤的建立與腹水瘤的接種 將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹elisa試劑盒水中含有瘤細胞,將這種腹水反復傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時,腹水常呈血性(含大量紅細胞),反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。
(1)將凍存或培養的腹水瘤細胞離心和洗滌,進行細胞計數。
(2)消毒動物,左下腹穿刺接種106腹水瘤細胞。
(3)接種腹水瘤細胞后約7~12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml。
elisa試劑盒(4)抽取的腹水經3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存備用。

KIF1B 驅動蛋白家族成員1B抗體
katanin p80 劍蛋白p80抗體
KIRREL1 腎病樣蛋白1抗體
SETDB1 組蛋白H3K9甲基轉移酶4抗體
KCNE3 鉀離子通道蛋白家族成員3抗體
Keratin82 角蛋白82抗體
C20orf19 20號染色體開放閱讀框19抗體
Keratocan 細胞角膜蛋白多糖抗體
KRCC1 含賴氨酸卷曲螺旋蛋白1抗體
Prostate Specific Antigen *3/*3抗體
KLF1, 2, 4 上皮鋅指蛋白1, 2, 4抗體
KLF4 腸道內富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白4抗體
KSR1 Ras信號轉導KSR1蛋白抗體
KLH 血藍蛋白抗體
KRIT1 腦海綿狀血管畸形蛋白1抗體
KBP KBP蛋白抗體
kappa Opioid receptor kappa型阿片受體抗體
Kininogen-1 heavy chain 激肽原1重鏈抗體


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