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上海撫生實業有限公司
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閱讀:664發布時間:2019-6-14
讓細胞活躍的訣竅多長時間嗎
讓細胞活躍的訣竅多長時間嗎?它們就人的心情一樣,只要你好好保護它就會增加細胞細胞活躍。如果細胞心情不好,那么實驗的結果也不會好到哪兒去。如何讓細胞?
1. 確保所有實驗室材料都無菌
交叉污染是細胞培養的大敵。即使是*輕微的污染,也可能毀了幾個星期的成果。因培養箱內溫暖潮濕,真菌極易生長,因此必須注意定期清潔。此外,在將培養瓶、移液管及其他的相關物品放入超凈臺之前,應用酒精擦拭干凈,以避免污染。
2. 小心處理您的培養物
細胞培養的脆弱性怎么強調也不為過。劇烈搖晃,或連續的溫度波動可能會對生長產生不利的影響。確保培養箱是水平的,溫度均一,且遠離電動儀器。此外,盡量避免一次處理多個細胞系,因為它可能會影響細胞的基因型和表型。您還應定期完成STR圖譜分析,以確認細胞系的身份。
3. 在使用前正確解凍細胞
盡管解凍看起來是個簡單的步驟,但必須操作得當,以免傷害細胞。長時間暴露在高溫條件下會使細胞無法鋪板。因此,凍存管應當在37°C水浴中放置2分鐘,然后用條件培養基稀釋,以避免DMSO造成直接傷害。
4. 使用對數生長期的細胞
細胞培養過程共有3個階段:停滯期、對數期和平臺期,分別代表了低細胞生長、高細胞生長和無細胞生長。*有活力的細胞是健康的,快速分裂的,在對數期以70-80%的匯合度存在。
5. 在傳代之前不要讓細胞*匯合
匯合度是指貼壁細胞占據培養瓶表面積的比例。*匯合意味著100%的表面都被貼壁細胞覆蓋。一定要避免這種狀態,因為它意味著細胞不能繼續生長。不過,當務之急是使用活躍生長的細胞。
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