西馬特羅檢測試劑盒 常言道“巧婦難為無米之炊”，但又云“有什么樣的米、做什么樣的飯”，也就是說，物品的先天屬性很重要，就像專業的事應由專業的人來做一樣，否則就難以收獲滿意的效果！就臨床熒光PCR檢測質量而言，“試劑盒的品質、操作人員的專業素質和儀器性能”，堪稱實驗室質量建設的三支點。其中，試劑盒的品質為重要。
一、
核酸提取方法對檢測質量的影響
1、煮沸法：試劑盒一般采用20%聚乙二醇6000（PEG）進行樣本核酸沉淀（或富集），去除上清液后，加入堿性裂解液煮沸，離心析出的上清液即作為PCR擴增的模板。這種方法的優點是操作簡單。但有以下不足：
（1）由于PEG沉淀物非常粘稠，裂解液較難*與之均勻混合，其混勻程度明顯影響核酸的釋放量，影響檢測的重復性；
（2）核酸純度低，干擾蛋白多，是試劑盒穩定性和敏感性差的主要原因；
（3）高溫煮沸的核酸釋放方式，大大增加實驗室氣溶膠污染的機會；
（4）核酸廢液難以封閉收集，防污染工作難度大，嚴重影響低拷貝樣本的準確定量。由于以上不足，目前試劑盒已少有使用。
2、微量核酸釋放劑：核酸釋放劑主要由堿性液體組成，與微量血清或血漿樣本混勻實現核酸的簡單裂解，PCR擴增反應液直接加入混合液中擴增。優點是操作簡單。但有以下不足：
elisa檢測試劑盒 （1）穩定性差：原因之一是，核酸釋放劑與擴增試劑為一對中合體，核酸釋放劑加入量的準確度直接影響擴增反應液的pH值或改變擴增試劑的組分；其次，微量操作是個技術活！操作的要求在普通實驗人員較難達到！這是直接被忽視的問題。如果把實驗室工作人員組織起來進行微量操作考核，結果你就會發現，能夠勝任的操作人員并不多！正因為操作“太簡單”、所以很容易“被自信”，出現問題后也很難從自身去尋找原因，試劑背黑鍋是大概率事件！檢驗醫學網
（2）敏感性低：除了樣本加入量少之外，樣本中的干擾物質也是導致敏感性不足和結果不穩定的重要因素。此外，如果試劑人員沒有采取核酸裂解液和擴增試劑的對抗干擾措施，其檢測質量難免會讓用戶失望。
（3）實驗室污染：這種簡單的操作步驟并沒有避免實驗室的污染，也是好多人無法理解的，但吹吸的操作不但攜帶出少量混合物，更重要的是Tip頭有吸附核酸的特性，因此難免發生實驗室的污染和核酸丟失。
3、吸附柱法：目前主要采用胍鹽為介質的核酸裂解和乙醇為介質的核酸漂洗，通過這種方法制備的核酸純度較高，但核酸丟失量大，而且丟棄的殘液和吸附柱存有大量核酸，為了消除乙醇對PCR擴增的影響，吸附柱的晾干過程不但費時費力，而且增加氣溶膠釋放的機會。
4、磁珠法：其原理與“吸附柱法”相同，只不過吸附核酸的載體不是纖維素膜，而是各種大小或修飾的磁珠，磁珠的性能差異是影響試劑盒質量的重要因素，如磁珠大小、懸浮性能、表面修飾成分及磁力大小都會影響磁珠吸附核酸的能力。
二、
擴增試劑品質與檢測質量
影響試劑盒品質的環節是多方面的，除了試劑要充分發揮創造智慧，出技術含量高而操作要求低的產品外，實驗人員也應努力提高自己的專業水平和操作技能，充分了解試劑盒的性能，查找實驗失敗的真正原因，只有雙方共同努力，才能切實提高實驗室的檢測水平。
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