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（一）  原理

    免疫電鏡技術(shù)是免疫化學(xué)技術(shù)與電鏡技術(shù)結(jié)合的產(chǎn)物，是在超微結(jié)構(gòu)水平研究和觀察抗原、抗體結(jié)合定位的一種方法學(xué)。它主要分為兩大類：一類是免疫凝集電鏡技術(shù)，即采用抗原抗體凝集反應(yīng)后，再經(jīng)負(fù)染色直接在電鏡下觀察；另一類則是免疫電鏡定位技術(shù)。該項技術(shù)是利用帶有特殊標(biāo)記的抗體與相應(yīng)抗原相結(jié)合，在電子顯微鏡下觀察，由于標(biāo)準(zhǔn)物形成一定的電子密度而指示出相應(yīng)抗原所在的部位。免疫電鏡的應(yīng)用，使得抗原和抗體定位的研究進入到亞細(xì)胞的水平。

（二）影響免疫電鏡的一些因素

1.標(biāo)記物 

    用于電鏡觀察的標(biāo)記物有三類：一類是電子密度致密的標(biāo)記物，如鐵蛋白、辣根過氧化物酶等。另一類則是放射性同位素，如135I、35S、32P、14C、3H等，第三類則是有*形狀的標(biāo)記物，如血蘭蛋白、噬菌體等。

    對標(biāo)記物的要求是：具有特定的形狀、不影響抗原抗體復(fù)合物的特性與形狀。目前用于免疫電鏡的標(biāo)記物主要是鐵蛋白和HRP.兩者各有其優(yōu)點，鐵蛋白電子密度致密。觀察時反差大，優(yōu)于酶標(biāo)記，但鐵蛋白分子量大（460 000），穿透能力差，所以適于細(xì)胞表面抗原的定位，另外鐵蛋白的標(biāo)記過程比較復(fù)雜。HRP分子量小（40 000），穿透力強，有利于標(biāo)記抗體進入細(xì)胞內(nèi)，適于細(xì)胞內(nèi)的抗原定位。

2.固定劑 

    固定是免疫電鏡較關(guān)鍵的一步，免疫電鏡中的固定與一般超薄切片中的固定的不同之點在于既考慮保存細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)，又要考慮到抗原的失活性問題。