我們首先把細(xì)胞做冷凍保存：① 株化細(xì)胞產(chǎn)生性狀轉(zhuǎn)變；② 污染；③ 株化細(xì)胞之增殖或生理特性有特定之限制，ELISA檢測試劑盒只能在一定的代數(shù)范圍內(nèi)進(jìn)行增殖培養(yǎng)或進(jìn)行特定實(shí)驗(yàn)。
目前可能解決這些困難的方法其中之一是細(xì)胞冷凍保存法，將冷凍細(xì)胞儲于冷凍管中，將其中一部分拿出來做一些必要的檢查，其它的冷凍細(xì)胞則在需要時拿出來解凍，用來進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。本方法亦可節(jié)省繼代培養(yǎng)時所花費(fèi)的勞力、物力，并可防止培養(yǎng)中經(jīng)常發(fā)生意外事故，喪失細(xì)胞珠。因此冷凍保存法為細(xì)胞培養(yǎng)基研究上之基本技術(shù)之一。
1. 經(jīng)過冷凍保存后的細(xì)胞，其生存率會下降，ELISA檢測試劑盒冷凍時之冷卻速度，保存溫度，解凍時升高溫度的速度以及添加之冷凍保存液之種類、濃度等都可影響細(xì)胞存活率。
2. 一般而言，4℃以下慢慢地冷凍，保存于液態(tài)氮中(-196℃)。
3. 37℃快速解凍。
4. 保護(hù)劑(抗凍劑)：添加甘油(10%左右)或dimethy1sulfoxide(DMSO)(5-10%) 。
5. 有些細(xì)胞如果采用上述的方法時，無法得到高的存活率。
此時，則必需考慮可能傷害細(xì)胞的機(jī)制，ELISA檢測試劑盒添加劑之作用等而來找出適當(dāng)?shù)臈l件來修正。所以，根據(jù)何描述，只要我們根據(jù)實(shí)際情況來修正培養(yǎng)基，用冷凍法保存細(xì)胞培養(yǎng)基利大于弊。
PPLO肉湯 250g 用于培養(yǎng)支原體的基礎(chǔ)培養(yǎng)基
PPLO Broth
支原體肉湯培養(yǎng)基 250g 用于培養(yǎng)支原體的基礎(chǔ)培養(yǎng)基
Mycoplasma Broth Medium
支原體肉湯培養(yǎng)基（不含瓊脂和酚紅） 250g 用于支原體的增菌培養(yǎng)
Mycoplasma Broth Medium
支原體瓊脂培養(yǎng)基（含*） 250g 用于支原體的分離培養(yǎng)
Mycoplasma Agar Base
PPLO瓊脂 250g 用于支原體分離和培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基
PPLO Agar
支原體半流培養(yǎng)基 250g 用于支原體的培養(yǎng)
Mycoplasma Semi-fluid Medium
美國藥典培養(yǎng)基（USP標(biāo)準(zhǔn)）
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