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ELISA試劑盒基礎培訓

閱讀:293發布時間:2016-5-17

在做ELISA試劑盒實驗過程中,難免會遇到各種不同的問題,比如標準曲線不好,試劑盒的回收率,假陰性,假陽性,實驗的重復性不好等等。ELISA試劑盒現在就來一一解答用戶們在實驗過程中遇到的各種疑問!
ELISA試劑盒曲線問題: 
1.OD值不正常
試劑盒未回溫,試劑盒回溫到25℃
溫度控制不好,控制正確溫度
孵育時間不準確,控制孵育時間
洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數增 加,洗滌4-5次,每孔250ul,然后拍干
陽光直射,對著風直接吹,避風避
酶標儀的波長錯誤,酶標儀的波長450nm
抗體的稀釋錯誤,正確的稀釋抗體
水質問題,用娃哈哈礦泉水代替
2.白   板
洗滌液配制錯誤,正確的配制洗滌液
少加液體(錯加液體),正確的步驟加液體
3.ELISA試劑盒無 梯 度
標準品也污染,換標準品點板
OD值不正常,控制溫度時間在做一次
人為點板,不要點板
4.線 性 不 好
OD值不正常,控制溫度時間在做一次
ELISA試劑盒回收率
1.空白管陽性高
樣本本身就是陽性樣本,換陰性樣本做回收率
空白管在實驗中被污染,實驗中防止交叉污染
水質原因用,娃哈哈礦泉水代替
2.偏  高
添加量不準確,的添加量
添加濃度不適合,ELISA試劑盒添加合適的濃度
取液吹干量多,準確的取液吹干
取到其它相層液體,取需用相吹干
復溶液未稀釋或加入量少,正確的稀釋復溶液
ELISA試劑盒
3.偏  低
添加量不準確,的添加量
添加濃度不適合,添加合適的濃度
取液吹干量少,準確的取液吹干
復溶液稀釋錯誤或加入量多,正確的稀釋復溶液

beta COP    β衣被蛋白抗體
Caspase 4+Caspase 11    半胱胺酸蛋白酶4/11抗體
C1orf187    1號染色體開放閱讀框187抗體
C9orf61    9號染色體開放閱讀框61抗體
CTBP2    C末端結合蛋白2抗體
C21ORF13    21號染色體開放閱讀框13抗體
Coronin 3    冠蛋白3抗體
CNTD    細胞周期蛋白N端結構域蛋白1抗體
CH25H    *25羥化酶抗體
Caspase-1 p20    天冬氨酸-*特異性蛋白酶家族抗體
Calneuron 1    鈣營養蛋白1/鈣結合蛋白8抗體
CABP5    鈣結合蛋白5/3抗體
SLC7A5    CD98輕鏈抗體
CLPS    胰輔脂酶抗體

ELISA試劑盒


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