上海懋康生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: 硫酸諾爾斯菌素,D-熒光素,雷帕霉素 |

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2021-12-21 閱讀(816)
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 |
產(chǎn)品編號 |
規(guī)格 |
價格(元) |
TRITC Phalloidin TRITC標(biāo)記鬼筆環(huán)肽 | MX4405-300T | 300T | 568 |
TRITC Phalloidin (Powder) TRITC標(biāo)記鬼筆環(huán)肽 | MX4406-1MG | 1mg | 4128 |
【溫馨提示】:見我司整理的鬼筆環(huán)肽及衍生物(Phalloidin and Phalloidin Conjugates)產(chǎn)品專題。
產(chǎn)品描述
鬼筆環(huán)肽(Phalloidin),又稱鬼筆鵝膏素,zui初是從毒蘑菇鬼筆鵝膏(Amanita phalloides)中分離到的一種七肽毒素,以*的親和力和特異性結(jié)合肌動蛋白絲F-actin(聚合形式的肌動蛋白),不會結(jié)合單體肌動蛋白(G-actin)。不像肌動蛋白抗體,同時識別單體和聚合形式的肌動蛋白。鬼筆環(huán)肽對大小纖維的親和力相近,在許多不同的動植物物種的肌肉和非肌肉細(xì)胞中,基本都按照一個肌動蛋白亞基與一個鬼筆環(huán)肽分子的化學(xué)計量比結(jié)合。不像肌動蛋白抗體,對不同物種或來源的肌動蛋白親和力會發(fā)生明顯變化。鬼筆環(huán)肽的非特異性結(jié)合幾乎可忽略,染色和未染色區(qū)域的差異極其明顯。鬼筆環(huán)肽使得肌動蛋白聚合/解離的臨界濃度降至1μg/ml,可用作一種聚合增強(qiáng)劑。另外,產(chǎn)生的復(fù)合物高度穩(wěn)定(解離常數(shù)約3×10–8 M),能夠抑制細(xì)胞松弛素、KI和溫度上升引起的去聚合和去組裝活性。
鬼筆環(huán)肽及其衍生物在納摩爾濃度即可對F-actin染色,且水溶性良好,是非常實用和方便的探針,對組織切片、細(xì)胞培養(yǎng)物或無細(xì)胞體系內(nèi)的F-actin進(jìn)行定性和定量研究。另外,鬼筆環(huán)肽及其衍生物很小,直徑約12–15 Å,分子量<2000 Da,經(jīng)標(biāo)記后的F-actin仍維持許多標(biāo)記前的功能。比如,標(biāo)記的甘油抽提肌纖維仍能收縮;標(biāo)記的肌動蛋白絲仍能在固相肌球蛋白基質(zhì)中移動。
本品為TRITC熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽(TRITC-Phalloidin),以溶于甲醇的20µM儲存液形式提供,具體的工作濃度請參考文獻(xiàn)或自身實驗體系來調(diào)整,常用濃度范圍80-200nM。按照100nM的工作濃度來算,可進(jìn)行300次細(xì)胞染色。
產(chǎn)品應(yīng)用
1)對固定的組織切片和組織細(xì)胞培養(yǎng)物進(jìn)行肌動蛋白絲(F-actin)的熒光染色;
2)體外制備穩(wěn)定的熒光肌動蛋白絲(F-actin);
注意事項
1)本品(Cat# MX4405)以溶于甲醇的儲存液(20µM)形式提供,300T包裝,適合用量少的研究者;另提供凍干粉形式(Cat# MX4406),1mg包裝,相對更經(jīng)濟(jì),適合用量多的研究者;
2)本品具有一定的毒性,LD50=2mg/kg,操作時請注意防護(hù)。
3)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
操作流程(免疫熒光染色)【詳見懋康整理】
有幾種方法都能用來染色組織細(xì)胞培養(yǎng)物內(nèi)的肌動蛋白絲(F-actin)染色,其中,固定步驟在獲得可信且具代表性的細(xì)胞F-actin分布情況中至關(guān)重要。固定步驟基于實驗自身需求來選擇。多聚甲醛或戊二醛都能得到優(yōu)秀的F-actin染色和良好的板狀偽足維持保存。
一、實驗材料準(zhǔn)備
二、染色工作液準(zhǔn)備
三、染色流程