小鼠饑餓素（ghrelin）ELISA試劑盒操作步驟
1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
1600ng/L5號標準品150µl的原倍標準品加入150µl標準品稀釋液
800ng/L4號標準品150µl的5號標準品加入150µl標準品稀釋液
400ng/L3號標準品150µl的4號標準品加入150µl標準品稀釋液
200ng/L2號標準品150µl的3號標準品加入150µl標準品稀釋液
100ng/L1號標準品150µl的2號標準品加入150µl標準品稀釋液
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50µl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl，然后再加待測樣品10µl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑50µl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50µl，再加入顯色劑B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10.終止：每孔加終止液50µl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
計算
以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
大鼠饑餓素(ghrelin)ELISA試劑盒注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，*使用排槍加樣。
4．請每次測定的同時做標準曲線，做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．小鼠饑餓素（ghrelin）ELISA試劑盒本試劑不同批號組分不得混用。
小鼠抗 SUMO 標簽蛋白單抗 纖維二糖 5g
小鼠抗 Trx 標簽蛋白單抗 纖維素酶 1g
小鼠抗 Trx 標簽蛋白單抗 纖維素 DE-52 100g
即用型 GFP 標簽蛋白裂解液 * 25mg
肝素瓊脂糖 氯化銫 10g
肝素瓊脂糖 十六烷基*基* 25g
藍膠瓊脂糖 CHAPS 1g
藍膠瓊脂糖 2-( 環(huán)己胺基 ) 乙烷磺酸 5g
DEAE 交換介質(zhì) 幾丁質(zhì) 10g
Q 交換介質(zhì) 氯化銨 T 5g
CM 交換介質(zhì) 矮壯素 100g
SP 交換介質(zhì) * 5g
Sephacryl S-400 基質(zhì) 4- 氯 -1- 萘酚 5g
苯基介質(zhì) * 100g
小鼠饑餓素（ghrelin）ELISA試劑盒
