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小鼠骨髓瘤細胞系； Lys30-51VH/Hu使用說明書

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更新時間：2017-02-06 10:24:55瀏覽次數：199次

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產品簡介

小鼠骨髓瘤細胞系； Lys30-51VH/Hu使用說明書細胞一般2-3天更換一次培養基，這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一，周三，周五更換培養基。

詳細介紹

產品名稱	小鼠骨髓瘤細胞系； Lys30-51VH/Hu使用說明書
貨期	3－5天
發貨地	上海

細胞名稱 小鼠骨髓瘤細胞系； Lys30-51VH/Hu使用說明書
形態特性   淋巴母細胞樣
生長特性半貼壁生長
特征特性   該細胞屬保藏，其特征特性尚未公開。
培養條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C6
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限未定

復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
SAPK3   絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶p38γ抗體
phospho-SAPK3 (Thr183+Tyr185)   磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶p38γ抗體
SLC14A2   尿素轉運型糖蛋白A2抗體
SLCO3A1   可溶載質轉運蛋白3A1抗體
SCOT2   含氧酸*轉移酶2A抗體
Salmonella enteritidis   腸炎沙門氏菌抗體
SEC14 like protein 2   SEC14樣蛋白2抗體
SEMA4D   跨膜蛋白SEMA4D抗體
ST5   抑癌蛋白5抗體
SMC3   基底膜相關軟骨素蛋白多糖抗體
STOML3   嗅覺神經相關蛋白STOML3抗體林澤蘭Eupatorium lindleyanum   Jaceosidin   合金歡素   18085-97-7   C17H14O7   ≥98%
裂葉崖角藤Rhaphidophora decursiva   Sesartemin   蒿脂麻木質體   77394-27-5   C23H26O8   ≥95%
蓼科植物掌葉大黃 Rheum palmatum L.   Rhaponticin   土大黃苷   155-58-8   C21H24O9   ≥98%
蓼科植物掌葉大黃 Rheum palmatum L.   Rhein-8-O-beta-D-glucopyranoside   大黃酸-8-O-β-D- 葡萄糖苷   113443-70-2   C21H16CaO11   ≥98%
遼東楤木Aralia elate(Miq.)Seem.   Araloside V   遼東楤木皂苷V   340963-86-2   C54H88O23   ≥98%
遼東楤木Aralia elate(Miq.)Seem.   Araloside VII   遼東楤木皂苷VII   340982-22-1   C54H88O24   ≥98%
遼東楤木Aralia elate(Miq.)Seem.   Araloside X   遼東楤木皂苷X   344911-90-6   C60H98O28   ≥98%
兩面針Zanthoxylum nitidum   Cuspidiol   4-[[(2E)-4-羥基-3-甲基-2-丁烯基]氧基]*   51593-96-5   C14H20O3   ≥95%
兩面針Zanthoxylum nitidum   p-Coumaryl alcohol   對羥基肉桂醇   3690/5/9   C9H10O2   ≥98%
兩面針 Zanthoxylum nitidum (Roxb.)DC.   Nitidine Chloride   氯化兩面針堿   13063-04-2   C21H18NO4+   ≥98%
兩面針 Zanthoxylum nitidum (Roxb.)DC.   Toddalolactone   毛兩面針素   483-90-9   C16H20O6   ≥98%
楝 Melia azedarach L.   Toosendanin   苦楝素   58812-37-6   C30H38O11   ≥98%
蓮子心 Nelumbo nucifera   Isoliensinine   異蓮心堿   6817-41-0   C37H42N2O6   ≥98%