原代細胞細胞培養(yǎng)中的微生物污染種類可分成細菌、支原體、真菌和病毒污染。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室環(huán)境不佳、污染之胎牛血清和污染之細胞等。細菌、支原體等微生物污染在細胞培養(yǎng)中有哪些特點？
1、細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。
2、支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是慢慢死。
3、真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。
4、病毒：組織細胞培養(yǎng)過程中，如果沒有除去潛在的病毒，就會產(chǎn)生病毒污染。目前，從原代猴腎細胞的培養(yǎng)中已發(fā)現(xiàn)不少于20種血清性病毒。 盡管病毒污染的細胞不影響原代培養(yǎng)，但疫苗是不安全的。因此，潛在病毒是細胞大量和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。
那么確定細胞受到哪種微生物污染之后，把污染細胞與其它細胞系隔離開，用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺，檢查HEPA過濾器。
原代細胞高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細胞系有毒性，因而，做劑量反應實驗確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平。這點在使用抗生素如*和抗霉菌素如泰樂菌素時尤其重要。
L-肌肽（5772
HT-5（579
EPA；順-5,8,11,14,17-十二碳五烯酸（5978
D-*（5457
DL-薄荷醇（5 62
DHA；順-4,7,10,1 ,16,19-二十二碳六烯酸（5979
D-(--奎寧酸;右旋奎寧酸（5285
8-甲氧基補骨脂素（花椒毒素（5458
7-甲氧基香豆素（5966
6-氧嘌呤（5777
6-生物蝶呤（5810
6，7二甲氧基香豆素（5909
5-羥甲基糠醛（5 51
5-羥基色胺鹽酸鹽（5791
原代細胞
