原代細(xì)胞檢測(cè)方法雙抗體夾心法
雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原zui常用的方法，操作步驟如下： 雙抗體夾心法
一、將特異性抗體與固相載體連接，形成固相抗體：洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
二、加受檢標(biāo)本：使之與固相抗體接觸反應(yīng)一段時(shí)間，讓標(biāo)本中的抗原與固相載體上的抗體結(jié)合，形成固相抗原復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合的物質(zhì)。
三、加酶標(biāo)抗體：使固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量正相關(guān)。
四、加底物：夾心式復(fù)合物中的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行該抗原的定性或定量。
根據(jù)同樣原理，將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標(biāo)抗原結(jié)合物，即可用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中的抗體。
在臨床檢驗(yàn)中，此法適用于檢驗(yàn)各種蛋白質(zhì)等大分子抗原，例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要獲得針對(duì)受檢抗原的異性抗體，就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。如抗體的來(lái)源為抗血清，包被和酶標(biāo)用的抗體分別取自不同種屬的動(dòng)物。如應(yīng)用單克隆抗體，一般選擇兩個(gè)針對(duì)抗原上不同決定簇的單抗，分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。這種雙位點(diǎn)夾心法具有很高的特異性，而且可以將受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體一起保溫反應(yīng)，作一步法檢測(cè)。
在一步法測(cè)定中，當(dāng)標(biāo)本中受檢抗原的含量很高時(shí)，過量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合，而不再形成"夾心復(fù)合物"。類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象，此時(shí)反應(yīng)后顯色的吸光值（位于抗原過剩帶上）與標(biāo)準(zhǔn)曲線（位于抗體過剩帶上）某一抗原濃度的吸光值相同，如按常法測(cè)讀，所得結(jié)果將低于實(shí)際的含量，這種現(xiàn)象被稱為鉤狀效應(yīng)（hook effect），因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)曲線到達(dá)高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時(shí)，反應(yīng)甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因此在使用一步法試劑測(cè)定標(biāo)本中含量可異常增高的物質(zhì)（例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等）時(shí)，應(yīng)注意可測(cè)范圍的zui高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應(yīng)。
HBVCL 人腦血管周細(xì)胞裂解物 200 µg
HCPECL 人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細(xì)胞裂解物 200 µg
HCPEpiCL 人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞裂解物 200 µg
HCPFL 人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞裂解物 200 µg
HMCL 人腦膜細(xì)胞裂解物 200 µg
HNL 人神經(jīng)細(xì)胞裂解物 200 µg
HCGCL 人小腦顆粒細(xì)胞裂解物 200 µg
HN-h L 人海馬趾神經(jīng)細(xì)胞裂解物 200 µg
HOPCL 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞裂解物 200 µg
HOPC-os L 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞-懸浮生長(zhǎng)裂解物 200 µg
HSCL 人雪旺細(xì)胞裂解物 200 µg
HPCL 人神經(jīng)束膜細(xì)胞裂解物 200 µg
HAL 人星形膠質(zhì)細(xì)胞裂解物 200 µg
HA-c L 人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞裂解物 200 µg
HA-sp L 人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞裂解物 200 µg
HA-h L 人海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞裂解物 200 µg
HML 人小膠質(zhì)細(xì)胞裂解物 200 µg
HDMECL 人微血管內(nèi)皮細(xì)胞裂解物 200 µg
HDLECL 人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞裂解物 200 µg
HEKL 人表皮角質(zhì)細(xì)胞裂解物 200 µg
HEK-a L 人表皮角質(zhì)細(xì)胞-成人裂解物 200 µg
HELM-l L 人表皮黑色素細(xì)胞-淺色素裂解物 200 µg
HELM-m L 人表皮黑色素細(xì)胞-中色素裂解物 200 µg
HELM-d L 人表皮黑色素細(xì)胞-深色素裂解物 200 µg
HDF-f L 人成纖維細(xì)胞-胎兒裂解物 200 µg
HDF-n L 人成纖維細(xì)胞-新生兒裂解物 200 µg
HDF-a L 人成纖維細(xì)胞-成人裂解物 200 µg
HHGMCL 人生發(fā)基質(zhì)細(xì)胞裂解物 200 µg
HLECL 人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞裂解物 200 µg
HLFL 人淋巴成纖維細(xì)胞裂解物 200 µg
HOKL 人口腔角質(zhì)細(xì)胞裂解物 200 µg
HGFL 人牙齦成纖維細(xì)胞裂解物 200 µg
HPLFL 人牙周膜成纖維細(xì)胞裂解物 200 µg
HEEpiCL 人食道上皮細(xì)胞裂解物 200 µg
HESMCL 人食道平滑肌細(xì)胞裂解物 200 µg
HIMECL 人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞裂解物 200 µg
HISMCL 人腸平滑肌細(xì)胞裂解物 200 µg
HCSMCL 人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞裂解物 200 µg
HPMECL 人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞裂解物 200 µg
HPAECL 人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞裂解物 200 µg
HPASMCL 人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞裂解物 200 µg
HPAFL 人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞裂解物 200 µg
HPAEpiCL 人肺泡上皮細(xì)胞裂解物 200 µg
HBEpiCL 人支氣管上皮細(xì)胞裂解物 200 µg
HTEpiCL 人氣管上皮細(xì)胞裂解物 200 µg
HSAEpiCL 人小氣道上皮細(xì)胞裂解物 200 µg
HPFL 人肺成纖維細(xì)胞裂解物 200 µg
HBSMCL 人支氣管平滑肌細(xì)胞裂解物 200 µg
HTSMCL 人氣管平滑肌細(xì)胞裂解物 200 µg
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