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上海邦景實業有限公司
墻壁威廉姆斯氏菌使用說明書低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至-35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法*保存。
產品名稱 | |
種屬 | Williamsia muralis |
發貨地 | 上海 |
資源名稱 墻壁威廉姆斯氏菌使用說明書
種屬 Williamsia muralis
分離基物 其他/石膏襯墻
提供形式 斜面培養物
模式菌株 yes
應用領域 模式菌株
培養方法
培養基 221
生長條件 28℃
存儲條件 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
詳細說明
描述 模式菌株;在TSB平板上,菌落光滑,橘紅色,生長溫度10-37℃(4或41℃未見生長),在營養瓊脂、R2A瓊脂和TSB瓊脂上生長良好,細胞球狀,無分支(0.4-0.5×0.6-1.4μm)
操作流程:
菌株復蘇:(按三區劃線法將留菌管內的原始菌株進行復蘇)
1) 所有菌株,顯色培養基分4區,每區一株,標明菌株號、菌種名常用縮寫如下:
cal: 白念珠菌 cgl:光滑念珠菌 cpa: 近平滑念珠菌 ctr: 熱帶念珠菌 ckr: 克柔念珠菌 cne: 新型隱球菌,其他菌種標記全名。
2) 隱球菌除傳顯色培養基以外,另傳1/2塊血平皿上述菌株統一37oC孵育48h
菌種鑒定:(48h后觀察結果)。
保藏方法
1. 傳代培養保藏法
又有斜面培養、穿刺培養、皰肉培養基培養等(后者作保藏厭氧細菌用),培養后于4-6℃冰箱內保存。
2. 液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養的變相方法,能夠適當延長保藏時間,它是在斜面培養物和穿刺培養物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,一方面可防止因培養基水分蒸發而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進入,以減弱代謝作用。
3. 載體保藏法
是將微生物吸附在適當的載體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應用相當廣泛。
4. 寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養基上生長的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動物、昆蟲、雞胚內感染并傳代,此法相當于一般微生物的傳代培養保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進行保藏。
5. 冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速凍結(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6. 冷凍干燥保藏法
先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現象除去水分(真空干燥)。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護劑來制備細胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對細胞的損害。保護性溶質可通過氫和離子鍵對水和細胞所產生的親和力來穩定細胞成分的構型。保護劑有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲亞砜等。
保存方法:
1.簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月。
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