資源名稱 百脈根中慢生根瘤菌*
種屬 Mesorhizobium loti
提供形式 斜面培養(yǎng)物
安全等級 1
模式菌株 no
應用領(lǐng)域 與百脈根共生固氮
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基 0063
生長條件 28-30℃
存儲條件 真空冷凍干燥法；礦物油法；定期移植法
詳細說明
描述 1、個體形態(tài)特征：桿狀，運動，有鞭毛，有夾膜，革蘭氏陰性，內(nèi)含PHB，裂殖
操作流程：
菌株復蘇：（按三區(qū)劃線法將留菌管內(nèi)的原始菌株進行復蘇）
1) 所有菌株，顯色培養(yǎng)基分4區(qū)，每區(qū)一株，標明菌株號、菌種名常用縮寫如下：
cal: 白念珠菌 cgl：光滑念珠菌 cpa: 近平滑念珠菌 ctr: 熱帶念珠菌 ckr: 克柔念珠菌 cne: 新型隱球菌，其他菌種標記全名。
2) 隱球菌除傳顯色培養(yǎng)基以外，另傳1/2塊血平皿上述菌株統(tǒng)一37oC孵育48h
菌種鑒定：（48h后觀察結(jié)果）。
保藏方法
1. 傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等（后者作保藏厭氧細菌用），培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。
2. 液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當延長保藏時間，它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟，一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡，另一方面可阻止氧氣進入，以減弱代謝作用。
3. 載體保藏法
是將微生物吸附在適當?shù)妮d體，如土壤、沙子、硅膠、濾紙上，而后進行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和濾紙保藏法應用相當廣泛。
4. 寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長的微生物，如病毒、立克次氏體、螺旋體等，它們必須在生活的動物、昆蟲、雞胚內(nèi)感染并傳代，此法相當于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進行保藏。
5. 冷凍保藏法
可分低溫冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速凍結(jié)（約-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。
6. 冷凍干燥保藏法
先使微生物在極低溫度（-70℃左右）下快速冷凍，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分（真空干燥）。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護劑來制備細胞懸液，以防止因冷凍或水分不斷升華對細胞的損害。保護性溶質(zhì)可通過氫和離子鍵對水和細胞所產(chǎn)生的親和力來穩(wěn)定細胞成分的構(gòu)型。保護劑有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲亞砜等。
保存方法：
1.簡單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1～2個月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3～4個月。
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