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海量 PCR 片段純化試劑盒5次實驗方法

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更新時間：2017-01-17 15:17:24瀏覽次數(shù)：191次

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產(chǎn)品簡介

海量 PCR 片段純化試劑盒5次實驗方法運輸及保存常溫運輸、4℃保存（miRNAon、miRNA Marker 需要-20C 保存）。保存期為一年。

詳細介紹

海量 PCR 片段純化試劑盒5次實驗方法使用方法：
一、準備工作 1. 用固相 RNase 清除劑清潔工作的臺面和器皿（詳見該產(chǎn)品的使用手冊）。 2. 配制 1 X 電泳緩沖液將適量的 10X 電泳緩沖液用 RNase-free 水稀釋 10 倍，得到 1X 電泳緩沖液待用。 3. 配制 10%過硫酸銨溶液精確稱取約 100 mg 過硫酸銨到一干凈的 1.5 mL 離心管中，按每 1 mg 過硫酸銨加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水，搖晃致溶，立即使用。注意：放置時間不要超過一周。
二、配制凝膠 1. 估計所需要的凝膠溶液的體積，一般配制一塊 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的膠需要 15 mL 凝膠溶液，配制一塊 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的膠需要 120 mL 凝膠溶液。 2. 新鮮的 40%的丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液的配制：在裝有 60g 丙烯酰胺干粉的瓶中加入約 130 mL 自備的去離子水，然后將全部甲叉雙丙烯酰胺加入到同一塑料瓶中（可以加少量丙烯酰胺溶液沖洗出來以避免粉末有毒粉末飄出。甲叉雙丙烯酰胺溶解度低，不會溶解在這少量溶液中）。充分搖晃混勻后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是這樣可以在下步留出足夠空間加尿素。
3. 根據(jù)所需要的凝膠溶液的體積，在一的干凈的三角瓶中按下表加入各成分（此處以配制 100mL 濃度為 15%的凝膠為例）:

4. 攪拌并加熱到 40-50℃左右，直到尿素*溶解。
5. 冷卻到室溫后，將三角瓶接上真空系統(tǒng)抽真空處理 10-15 分鐘以充分去除溶液中的氧氣（氧氣會降低聚合反應效率）。但如果實驗條件有限，此步也可以省略。
6. 邊搖晃溶液變加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%過硫酸銨。注意：即使選擇其他工作濃度的 Acrylamide/Bis，TEMED 和 10%過硫酸銨的用量也不需要隨之改變。但如果配置的凝膠溶液的體積變化，TEMED 和 10%過硫酸銨的用量也要按比例改變。
7. 再充分搖晃約 30 秒后迅速灌膠，然后插入樣品梳。
8. 室溫放置 30-60 分鐘使膠凝固。
9. 將凝膠板放置在電泳裝置上后，在上下層分別加入適當量的 1X 電泳緩沖液。如果不馬上使用，需要有濕紙將上樣孔端蓋住以防凝膠過度干燥。
10. 拔出梳子后用加樣槍吸取電泳緩沖液，充分將每個加樣空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和氣泡吹打出來。

海量 PCR 片段純化試劑盒5次實驗方法產(chǎn)品及特點：
尿素-聚丙烯酰胺凝膠電泳(Urea PAGE)是目前分離 200 nt 以下的小片段 RNA，尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法，但是單獨配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1. 一站式，含有電泳所需要的所有試劑，即開即用，十分方便，免去了實驗人員稱取有毒物品。
2. 靈活，可以根據(jù)需要配制各種濃度的 Urea-PAGE，以便對長度各異的 RNA 進行電泳。
3. 電泳后可直接用于 UV 觀察、銀染、膠回收、Northern 雜交和放射自顯影等。
4. 使用新型緩沖液，可以防止甘油的干擾。
產(chǎn)品介紹：

N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲基本胺鈉鹽
〖英文名稱〗：TOPS sodium salt；Sodium 3-(N-ethyl-3-methylanilino)propanesulfonate；3-(N-Ethyl-3-methylanilino)propanesulfonic acid sodium salt
〖其他名稱〗：N-乙基-N-(3-磺丙基)間甲苯胺鈉鹽
〖CAS號〗：40567-80-4
C12H18NNaO3S=279.33
〖級別〗：試劑級
〖含量〗：≥98%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：白色結(jié)晶粉末。溶于水
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)酶光度法測定過氧化輕的水溶性試劑。
〖保存〗：RT，避光。保質(zhì)期5年
雙向電泳指示劑
〖英文名稱〗：Tracking Dye-2D
〖級別〗：Proteomics
〖折光率〗：1.37～1.41
比重：1.149～1.159
Protease：None detected

Iron瓊脂250g用于產(chǎn)
TCBS agar Vibrio selective agar TCBS瓊脂/弧菌選擇瓊脂 1.10263.0500 MERCK默克 incubation media TCBS agar Vibrio selective agar TCBS瓊脂/弧菌選擇瓊脂 1.10263.0500 MERCK默克
Koser氏枸櫞酸鹽肉湯 100g 用于細菌的枸櫞酸鹽的試驗。
LactoseBileBroth
*發(fā)酵培養(yǎng)基 250g 生化試驗培養(yǎng)基，用于細菌(如*)*發(fā)酵試驗(GB標準)
IronAgar
Test agar fo the residue test acc.to KUNDRAT測試瓊脂(殘余測試) 1.10662.0500 MERCK默克 incubation media Test agar fo the residue test acc.to KUNDRAT測試瓊脂(殘余測試) 1.10662.0500 MERCK默克
西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基 100g 用于腸道菌的檸檬酸鹽利用試驗
結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)300ml/袋*大腸菌的固體平板檢測
MannitolMedium
STAA培養(yǎng)基250g用于熱死環(huán)絲菌的分離培養(yǎng)。
Agar test PH6.0 for the inhibitor test測試瓊脂PH6.0(抑制劑測試) 1.10663.0500 MERCK默克 incubation media Agar test PH6.0 for the inhibitor test測試瓊脂PH6.0(抑制劑測試) 1.10663.0500 MERCK默克
蛋白胨水(靛基質(zhì)培養(yǎng)基) 100g 供鑒別細菌能否產(chǎn)生靛基質(zhì)的生化反應
VioletRedBileAgar
綠膿菌素測定培養(yǎng)基(PAP瓊脂培養(yǎng)基) 250g 用于綠膿桿菌的綠膿菌素測定試驗
STAAMedium
Test test PH7.2 for the inhibitor test測試瓊脂PH7.2(抑制劑測試) 1.15787.0500 MERCK默克 incubation media Test test PH7.2 for the inhibitor test測試瓊脂PH7.2(抑制劑測試) 1.15787.0500 MERCK默克
糖發(fā)酵培養(yǎng)基基礎 250g 供鑒別各種腸道菌對糖類的發(fā)酵反應用
鹽胱酸增菌液(SC)300ml/袋*沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)(GB、SN標準)
TTC*-吐溫80-營養(yǎng)瓊脂 250g 用于化妝品中細菌總數(shù)測定(GB標準)
發(fā)光菌培養(yǎng)基250g用于發(fā)光菌的分離培養(yǎng)。
Test test PH8.0for the inhibitor test測試瓊脂PH8.0(抑制劑測試) 1.10664.0500 MERCK默克 incubation media Test test PH8.0for the inhibitor test測試瓊脂PH8.0(抑制劑測試) 1.10664.0500 MERCK默克
氨基酸脫羧酶試驗基礎培養(yǎng)基 100g 供鑒別腸道菌屬能否產(chǎn)生氨基酸脫羧酶用
SeleniteCystineBroth
TTCLecithinTween80NutrientAgar
photobacteriumMedium
Tetrathionate enrichment broth( base) acc.to MULLER-KAUFFMAN 1.10863.0500 MERCK默克 incubation media Tetrathionate enrichment broth( base) acc.to MULLER-KAUFFMAN 1.10863.0500 MERCK默克
三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基(TSI) 250g 用于鑒別腸道菌發(fā)酵蔗糖、乳糖、葡萄糖及產(chǎn)生硫化氫的生化反應
四硫磺酸鹽煌綠增菌液基礎(TTB)300ml/袋*沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)
HC瓊脂基礎 250g 用于化妝品中霉菌總數(shù)測定
產(chǎn)組胺菌培養(yǎng)基250g用于產(chǎn)組胺菌分離培養(yǎng)。
TGE agar Tryptone glucose extract agarTCE 瓊脂/胰蛋白胨葡萄糖瓊脂 1.10128.0500 MERCK默克 incubation media TGE agar Tryptone glucose extract agarTCE 瓊脂/胰蛋白胨葡萄糖瓊脂 1.10128.0500 MERCK默克
三糖鐵瓊脂(TSI) 250g 用于鑒別腸道菌發(fā)酵蔗糖、乳糖、葡萄糖及產(chǎn)生硫化氫的生化反應
TetrathionateBrothBase
HCAgarBase
oxin-ProducingMedium