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亞鐵螯合酶(FECH)ELISA試劑盒說明書

閱讀:209發布時間:2015-02-09

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亞鐵螯合酶(FECH)ELISA試劑盒說明書
本試劑僅供研究使用  標本:體液

亞鐵螯合酶(FECH)ELISA試劑盒說明書試驗原理:
BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將BFGF和*標記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA 檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關系。

亞鐵螯合酶(FECH)ELISA試劑盒說明書自備材料
1.蒸餾水。
2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性
1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

亞鐵螯合酶(FECH)ELISA試劑盒說明書操作注意事項
1.試劑應按標簽儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7.底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9.按照中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

亞鐵螯合酶(FECH)ELISA試劑盒說明書樣品收集、處理及保存方法
1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準備
標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。

2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

亞鐵螯合酶(FECH)ELISA試劑盒說明書操作步驟
1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9.在450nm波長處測定各孔的OD值。

局限
6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。

亞鐵螯合酶(FECH)ELISA試劑盒說明書性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

亞鐵螯合酶(FECH)ELISA試劑盒說明書結果判斷與分析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的BFGF標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的BFGF含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值范圍:0-800pg/ml

4、敏感度: 1.0 pg/ml

 NADPH  小鼠*腺嘌呤二核苷酸磷酸  規格: 48T/96T

 PF-4/CXCL4  小鼠血小板因子4  規格: 48T/96T

 PF-3  小鼠血小板因子3  規格: 48T/96T

 PDGFsR-α  小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α  規格: 48T/96T

 PDGF-BB  小鼠血小板衍生生長因子BB  規格: 48T/96T

 PDGF-AB  小鼠血小板衍生生長因子AB  規格: 48T/96T

 PDGF  小鼠血小板衍生生長因子  規格: 48T/96T

 TPO  小鼠血小板生成素  規格: 48T/96T

 GP-ⅡbⅢa  小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa  規格: 48T/96T

 PAF  小鼠血小板活化因子  規格: 48T/96T

 TSP-1  小鼠血小板反應蛋白/*敏感蛋白1  規格: 48T/96T

 FDP  小鼠血纖蛋白原降解產物  規格: 48T/96T

 Fbg  小鼠血纖蛋白原  規格: 48T/96T

 TXB2  小鼠血栓素B2  規格: 48T/96T

 TpP  小鼠血栓前體蛋白  規格: 48T/96T

 TM  小鼠血栓調節蛋白  規格: 48T/96T

 CH50  小鼠血清總補體  規格: 48T/96T

 NO  小鼠血清一氧化氮  規格: 48T/96T

 SAA  小鼠血清淀粉樣蛋白A  規格: 48T/96T

 GMP-140  小鼠血漿α顆粒膜蛋白  規格: 48T/96T

 HO-2  小鼠血紅素氧合酶2  規格: 48T/96T

 HO-1  小鼠血紅素氧合酶1  規格: 48T/96T

 vWF  小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子  規格: 48T/96T

 BK  小鼠血管舒緩激肽  規格: 48T/96T

 ANG-R-Tie2  小鼠血管生成素受體Tie2  規格: 48T/96T

 ANG-R-Tie1  小鼠血管生成素受體Tie1  規格: 48T/96T

 ANG-4  小鼠血管生成素4  規格: 48T/96T

 ANG-2  小鼠血管生成素2  規格: 48T/96T

 ANG-1  小鼠血管生成素1  規格: 48T/96T

 ANG  小鼠血管生長素  規格: 48T/96T

 VCAM-1/CD106  小鼠血管內皮細胞粘附分子1  規格: 48T/96T

 VEGFR-3  小鼠血管內皮細胞生長因子受體-3  規格: 48T/96T

 VEGFR-2  小鼠血管內皮細胞生長因子受體2  規格: 48T/96T

 VEGFR-1  小鼠血管內皮細胞生長因子受體1  規格: 48T/96T

 VEGF-D  小鼠血管內皮細胞生長因子D  規格: 48T/96T

 VEGF-C  小鼠血管內皮細胞生長因子C  規格: 48T/96T

 VEGF-B  小鼠血管內皮細胞生長因子B  規格: 48T/96T

 VEGF  小鼠血管內皮細胞生長因子  規格: 48T/96T

 ACE  小鼠血管緊張素轉化酶  規格: 48T/96T

 aGT  小鼠血管緊張素原  規格: 48T/96T

 ANG-Ⅱ  小鼠血管緊張素Ⅱ  規格: 48T/96T

 Ang-Ⅰ  小鼠血管緊張素Ⅰ  規格: 48T/96T

 VIP  小鼠血管活性腸肽  規格: 48T/96T

 BrdU  小鼠溴脫氧核苷*  規格: 48T/96T

 ASD  小鼠雄烯二酮  規格: 48T/96T

 Smad7  小鼠信號轉導分子7  規格: 48T/96T

 Smad1  小鼠信號轉導分子  規格: 48T/96T

 NN-T4  小鼠新生甲狀腺素  規格: 48T/96T

 ANP  小鼠心鈉肽  規格: 48T/96T

小鼠心肌轉錄因子GATA4 ELISA Kit,48T/96T  小鼠心肌轉錄因子GATA4 ELISA Kit,48T/96T  規格: 48T/96T

 CT-1  小鼠心肌營養素1  規格: 48T/96T

 cTn-Ⅰ  小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ  規格: 48T/96T

 cTn-Ⅰ  小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ  規格: 48T/96T

 TAFI  小鼠纖溶抑制因子  規格: 48T/96T

 PAI-1  小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1  規格: 48T/96T

 PAI  小鼠纖溶酶原激活物抑制因子  規格: 48T/96T

 PAP  小鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物  規格: 48T/96T

 FN  小鼠纖連蛋白  規格: 48T/96T

 Cyclin-D3  小鼠細胞周期素D3  規格: 48T/96T

 Cyclin-D2  小鼠細胞周期素D2  規格: 48T/96T

 Cyclin-D1  小鼠細胞周期素D1  規格: 48T/96T

 Cyt-C  小鼠*  規格: 48T/96T

 SmIg  小鼠細胞膜表面免疫球蛋白  規格: 48T/96T

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 


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