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技術文章

即用型評板培養基實驗過程必知小知識

閱讀:147發布時間:2018-1-8

即用型評板培養基實驗過程必知小知識:
① 建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。
② 若顯色過淺,可適當延長底物溫育時。
③ 實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
④ 酶標包被板開封后如未用完,應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
⑤ 標本宜在新鮮時檢測,如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應,保存過久可發生聚合在ELISA中可使本底加深。
⑥ 凍結標本溶解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛混合,不要在混勻器上強烈震蕩。
⑦ 渾濁或有沉淀的標本應先離心或過濾,澄清后再檢測。
⑧ 反復凍融會使蛋白效價降低,所以代測樣本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。
樣本處理的具體方法
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
即用型評板培養基大鼠抗鏈球菌溶血素O抗體(IgG)ELISA Kit    英文名:    Rat anti-streptolysin O antibody IgG ELISA Kit
大鼠抗利尿激素/血管加壓素/*加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA Kit    英文名:    Rat arginine vasopressin,AVP ELISA kit
大鼠抗甲狀腺素(T4)抗體(IgG)ELISA Kit    英文名:    Rat anti-thyroxine(T4)antibody IgG ELISA kit
大鼠抗環胍氨酸肽抗體(Anti-CCP-antibody)ELISA Kit    英文名:    Rat Anti-Cyclic Citrullinated Peptide Antibody(Anti-CCP-antibody)ELISA Kit
大鼠抗弓形蟲IgM抗體ELISA Kit    英文名:    Rat anti-toxoplasmosis IgM Antibody ELISA kit
大鼠抗弓形蟲IgG抗體ELISA Kit    英文名:    Rat anti-toxoplasmosis IgG Antibody ELISA kit
大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA Kit    英文名:    Rat macrophage inflammatory protein 1β,MIP-1β ELISA kit
大鼠巨噬細胞替代激活相關化學因子1(AmAC-1)ELISA Kit    英文名:    Rat Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AMAC-1 ELISA Kit
大鼠精銨脲水解酶(AGMAT)ELISA Kit    英文名:    Rat Agmatine Ureohydrolase/Agmatinase,AGMAT ELISA Kit
大鼠*酶1(ARG1)ELISA Kit    英文名:    Rat Arginase 1,ARG1 ELISA Kit
大鼠*加壓素受體1A(AVPR1A)ELISA Kit    英文名:    Rat Vasopressin V1a receptor,AVPR1A ELISA kit
大鼠*(Arg)ELISA Kit    英文名:    Rat arginine,Arg ELISA kit
大鼠緊密連接蛋白1(ZO1)ELISA Kit    英文名:    Rat tight junction protein 1,ZO1 ELISA Kit
大鼠緊密連接蛋白(Ocln)ELISA Kit    英文名:    Rat Occludin,Ocln ELISA kit
大鼠金屬轉運蛋白1(MTP1)ELISA Kit    英文名:    Rat Metal Transporter Protein 1,MTP1 ELISA Kit
大鼠金屬硫蛋白2(MT-2)ELISA Kit    英文名:    Rat Metallothionein-2,MT-2 ELISA Kit
大鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA Kit    英文名:    Rat A Disintegrin And Metalloprotease 9,ADAM9 ELISA Kit
大鼠解整合素樣金屬蛋白酶19(ADAM19)ELISA Kit    英文名:    Rat A Disintegrin And Metalloprotease 19,ADAM19 ELISA Kit
大鼠角化細胞生長因子(KGF)ELISA Kit    英文名:    Rat Keratinocyte Growth Factor,KGF ELISA Kit
大鼠膠原吡啶交聯(PYD)ELISA Kit    英文名:    Rat pyridinoline,PYD ELISA Kit
大鼠膠原C末端肽(CTX)ELISA Kit    英文名:    Rat C-opeptide of collagen,CTX ELISA Kit
大鼠降鈣素原(PCT)ELISA Kit    英文名:    Rat procalcitonin,PCT ELISA kit即用型評板培養基

 


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