【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人胚腎293細胞;HIK293ar操作步驟
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C2
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
操作步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢:
1、細胞株種類齊全,包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等
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血管非炎性蛋白2(VNN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
線粒體融合素2(MFN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
Midline 2蛋白(MID2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
多聚蛋白2(MMRN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
Metaxin 2蛋白(MTX2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
黑素皮質激素4受體(MC4R)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
黑素皮質激素5受體(MC5R)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
神經元導向因子3(NAV3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
神經元導向因子2(NAV2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
溶血磷脂酶Ⅲ(LYPLA3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
Piccolo蛋白(PCLO)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
腎胱素5(NPHP5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
磷酸二酯酶7A(PDE7A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
磷酸二酯酶8A(PDE8A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
磷酸二酯酶8B(PDE8B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
磷酸二酯酶9A(PDE9A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
磷酸二酯酶10A(PDE10A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
磷酸二酯酶11A(PDE11A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
磷酸二酯酶12(PDE12)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
甘油磷酸二酯磷酸二酯酶1(GDE1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
Nebulette蛋白(NEBL)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗
ZEB1/AREB6 負調控因子白細胞介素2抗體
phospho-PTPN6(Tyr536) 磷酸化蛋白*磷酸酶1C抗體
phospho-PTPN6(Ser591) 磷酸化蛋白*磷酸酶1C抗體
PTPN6/SHP1 蛋白*磷酸酶1C抗體
SIRT1 沉默調節蛋白1抗體
Phospho-SirT1 (Ser27) 磷酸化沉默調節蛋白1抗體
Phospho-SIRT1(Ser47) 磷酸化沉默調節蛋白1抗體
SIRT6 沉默調節相關蛋白6抗體
phospho-SIRT6(Ser338) 磷酸化沉默調節相關蛋白6抗體
Skp2/skp2 p45 細胞S期激酶相關蛋白2抗體
SLC4A4 *協同轉運蛋白4-A4抗體
Slc4a7/Nbcn1 *協同轉運蛋白4-A7抗體
SLC9A9 鈉氫通道蛋白9家族A9抗體
SLC39A7 轉運蛋白家族39成員7抗體
NGALR/Slc22A17 可溶性載質轉運蛋白22A17抗體
SLC24A5 可溶性載質轉運蛋白SLC24A5抗體
SLCO2B1/OATPB 可溶性載質轉運蛋白2B1抗體
SLC25A10 線粒體二羧酸載體蛋白抗體
SLC25A11 線粒體二羧酸載體蛋白11抗體
Slc26a5 感覺神經性耳聾常染色體隱性遺傳61抗體
SLC25A13 線粒體內鈣結合天冬氨酸/*載體蛋白抗體
SLC37A4/G6PT2 葡萄糖-6磷酸轉運蛋白抗體
SLC6A19 鉀依賴鈉鈣交換蛋白6
SLC7A9 離子轉運相關蛋白SLC7A9抗體
SLC16A7/MCT2 單羧酸轉運蛋白2抗體
SLC16A3/MCT4 單羧酸轉運蛋白3/4抗體