慢病毒滴度檢測(cè)是檢驗(yàn)慢病毒是否合格的方法之一。在一些特定的實(shí)驗(yàn)中，我們需要為病毒的濃度，即滴度，進(jìn)行測(cè)定。由于慢病毒載體的不同以及客戶需求的不同，有的慢病毒會(huì)帶有熒光標(biāo)記，而有的沒(méi)有，故而滴度檢測(cè)也有不同的方法。

一、ELISA法

傳統(tǒng)的p24 ELISA可檢測(cè)到293細(xì)胞在瞬時(shí)轉(zhuǎn)染過(guò)程中產(chǎn)生的病毒相關(guān)p24和游離p24，而游離的p24可以占上清液中p24總量的很大一部分。因此，傳統(tǒng)的p24 ELISA通常會(huì)高估存在的慢病毒的數(shù)量。

新的QuickTiter慢病毒滴度試劑盒（與慢病毒相關(guān)的HIV p24）可zui大程度地減少此問(wèn)題。一項(xiàng)專有技術(shù)可在運(yùn)行測(cè)定的ELISA部分之前，將慢病毒與溶液中的游離p24分離。

二、Real-time PCR法

GeneCopoeia的Lenti-Pac 慢病毒滴度檢測(cè)試劑盒系列產(chǎn)品為簡(jiǎn)便、快速檢測(cè)慢病毒顆粒的滴度而設(shè)計(jì)。試劑盒包含從RNA抽提到qRT- PCR檢測(cè)過(guò)程的全套試劑，樣品經(jīng)過(guò)RNA抽提、DNase消化、反轉(zhuǎn)錄、qRT-PCR步驟即可確定慢病毒滴度。

特點(diǎn)：

1.能夠判斷慢病毒是否包裝成功；

2.準(zhǔn)確測(cè)定病毒拷貝數(shù)，以確保細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)和基因表達(dá)的效率；

3.提供滴度檢測(cè)過(guò)程從病毒的RNA提取到qPCR檢測(cè)所需要的試劑。

綜上，慢病毒滴度檢測(cè)：ELISA法結(jié)合qPCR法，想怎么測(cè)就怎么測(cè)~

文章來(lái)源：艾美捷科技