Western印跡阻斷溶液是專(zhuān)為使用熒光色素結(jié)合抗體的Western blotting而設(shè)計(jì)的。建議使用純硝酸纖維素膜以獲得最佳性能。可以使用其他膜，例如嵌入載體中的PVDF或硝化纖維素，但可能會(huì)產(chǎn)生升高的背景。應(yīng)使用標(biāo)準(zhǔn)方案將蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到膜。阻斷緩沖液可用于膜阻斷和稀釋初級(jí)和次級(jí)抗體。

艾美捷 Rockland 熒光WB封閉緩沖液適用于Bio-Rad Laboratories、GE Healthcare、Alpha Innotech、FujiFilm Life Science、Licor Biosciences、UVP和Syngene生產(chǎn)的熒光Western Blot成像系統(tǒng)。熒光技術(shù)廣泛用于在可見(jiàn)光和近紅外范圍內(nèi)檢測(cè)蛋白質(zhì)。

當(dāng)熒光色素結(jié)合抗體用于蛋白質(zhì)印跡和其他應(yīng)用中的蛋白質(zhì)可視化時(shí)，艾美捷 Rockland 熒光WB封閉緩沖液允許卓丨越的信號(hào)檢測(cè)和較低的背景噪聲。

用IRDye®800和IRDye®700DX（Licor）制備的抗體綴合物™, Cy3™, Cy3.5™, Cy5™ 和Cy5.5™ （GE Healthcare），DyLight™405，動(dòng)態(tài)光™ 549，DyLight™ 649，DyLight™ 680和DyLight™ 800（Thermo Fisher/Pierce）和Alexa Fluor®488、Alexa Floor®532、Alexas Fluor®546、Alexar Fluor®647和Alexas Floor®680（Invitrogen/Molecular Probe）已在各種平臺(tái)上進(jìn)行了驗(yàn)證，與其他相比，具有優(yōu)異的結(jié)果。

在幾乎沒(méi)有自發(fā)熒光發(fā)生的紅外范圍內(nèi)，特定信號(hào)在任何背景下都非常明顯，提供了最佳的信噪比。這允許在皮克范圍內(nèi)檢測(cè)水平，其可與用于蛋白質(zhì)印跡的膜上化學(xué)發(fā)光的靈敏度相媲美。

當(dāng)艾美捷 Rockland 熒光WB封閉緩沖液用于western印跡或顯微鏡中的同時(shí)標(biāo)記（多重）時(shí)，也可以看到優(yōu)異的結(jié)果，使用各種熒光色素組合進(jìn)行多色成像。用該封閉的膜可以干燥并且非常穩(wěn)定。可以重新清洗和/或重新掃描儲(chǔ)存的避光膜。

艾美捷 Rockland 熒光WB封閉緩沖液實(shí)例展示：

圖：Rockland 熒光WB封閉緩沖液專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)用于蛋白質(zhì)印跡熒光色素結(jié)合抗體，可用于膜分離阻斷并稀釋初級(jí)和次級(jí)抗體。制備該緩沖液使用溶于醫(yī)藥級(jí)水中的超純?cè)噭?span style="font-family: Calibri;">WFI）并由TRIS中的專(zhuān)有蛋白質(zhì)制劑組成pH 7.6的緩沖鹽水