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*重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA試劑盒說明書
閱讀:95 發(fā)布時(shí)間:2019-10-28*重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA試劑盒的詳細(xì)資料:
英文名稱:Human immunoglobulin heavy chain variable region (IgHV) ELISA kit
貨號(hào):KS10570
規(guī)格:96T/48T
使用范圍:科研范圍內(nèi)使用
各種種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛、羊…
標(biāo)本齊全:血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液、關(guān)節(jié)液、胸腔yi液等…
保存條件:2-8℃
實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人肌酸激酶腦型同工酶(CK-BB)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人肌酸激酶腦型同工酶(CK-BB)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
*重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA試劑盒樣本處理及要求
1. 血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會(huì)影響后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。
*重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA試劑盒需要而未提供的試劑和器材
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
4. 蒸餾水或去離子水
試劑準(zhǔn)備
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
*重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA試劑盒操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
*重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。
6. 在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
9. 不能使用過期產(chǎn)品。
10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
*重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA試劑盒洗板方法
手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。
*重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品:
KS11971 大鼠26S蛋白酶體(26SPSM)ELISA試劑盒
KS11972 人CXC趨化因子受體1(CXCR1)ELISA試劑盒
KS11973 兔子膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒
KS11974 人*脫氫酶(GDH)ELISA試劑盒
KS17890 豬白介素5(IL5)ELISA試劑盒
KS11976 人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒
KS11977 人*Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒
KS11978 人水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒
KS11979 人瘦素(LEP)ELISA試劑盒
KS11980 人磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒
KS11981 小鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒
KS11982 人Dickkopf1(DKK1)ELISA試劑盒
KS11983 人輪狀病毒(RV)IgMELISA試劑盒
KS11984 小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA試劑盒
KS11985 大鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒
KS10528 豬白介素6(IL-6)ELISA試劑盒
KS11987 小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒
KS11988 小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒
KS11989 人組織蛋白酶抗體(CathAb)ELISA試劑盒
KS11990 人膀胱癌抗原(UBC)ELISA試劑盒
KS11991 小鼠*(VE)ELISA試劑盒
KS11992 人流行性腮腺炎(EP)ELISA試劑盒
KS11993 兔子可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒
KS11994 大鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒
KS11995 人內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒
KS11996 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA試劑盒
KS11997 小鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒
KS11998 大鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒
KS11999 大鼠胰島素原(PI)ELISA試劑盒
KS12000 人真胰島素(TI)ELISA試劑盒
KS12001 人表面活性蛋白D(SP-D)ELISA試劑盒
KS12002 大鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒
KS12003 人二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)ELISA試劑盒
KS12005 人補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)ELISA試劑盒
KS12006 大鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA試劑盒
KS12007 大鼠雌激素受體(ER)ELISA試劑盒