阿爾新藍-核固紅染色試劑盒(pH1.0)

　　阿爾新藍-核固紅染色試劑盒(pH1.0) (Alcian Blue & Nuclear Fast Red Staining Kit, pH1.0)是一種通過阿爾新藍對含有硫酸根(sulfated)的組織如硫酸化黏液物質或強硫酸化黏液物質(strongly sulfated mucosubstances)等進行染色的試劑盒，同時提供核固紅進行復染。本產品對不同組織的石蠟切片和冰凍切片均適用，也可用于血涂片和骨髓涂片的染色。

　　本試劑盒染色時無須額外的酸化操作步驟，染色步驟更加簡單便捷。

　　阿爾新藍(Alcian Blue)，也稱阿爾新藍8G、阿利新藍或愛先藍，是一種類銅鈦花青共軛染料，最初用于紡織纖維染色。阿爾新藍的分子式為 C56H68N16S4Cl4Cu，分子量為1298.86，CAS號為33864-99-2，墨綠色結晶，有金屬光澤，溶于水。阿爾新藍屬于陽離子染料，中央含銅的酞菁環與四個異硫脲基通過硫醚鍵相連而成，異硫脲基呈中度堿性，使阿爾新藍帶陽離子。阿爾新藍使酸性物質著色的機制尚不十分明確，一般認為是陽離子的異硫脲基通過靜電與組織內的多聚陰離子如酸性黏液物質的羧基或硫酸根形成不溶性復合物，即染料分子中帶正電荷的鹽鍵和酸性黏液物質中帶負電荷的酸性基團結合呈藍色。

　　阿爾新藍是顯示酸性黏性物質最特異的染料，所以阿爾新藍染色又可以稱為粘蛋白染色(mucin stain)。阿爾新藍染料與酸性黏液物質中酸性基團形成鹽鍵，利用染料的不同pH值，可區分酸性黏液物質的類別：當阿爾新藍染色液的pH值為1.0時，使含有硫酸根(sulfated)的組織如酸性硫酸化或強硫酸化黏液物質染成藍色，而不能染色含有羧基的組織;當阿爾新藍染色液的pH值為2.5時，也可以使結締組織或軟骨中含有羧基(carboxylated)的組織如唾液粘多糖蛋白(sialomucins)、透明質酸(hyaluronic acid)及上皮酸性黏蛋白(epithelial acid mucin)等染為藍色，但對于含有硫酸根的組織，pH2.5的染色要弱于pH1.0;中性黏蛋白如胃黏膜和Brunner腺體部位的中性黏蛋白等不能與阿爾新藍反應。核固紅染色液復染可使核染成粉紅色或紅色。阿爾新藍-核固紅染色試劑盒(pH1.0)染色后酸性黏性物質和細胞核的顏色見下表：

　　SamplesColor

　　硫酸化黏液物質(Sulfated Mucosubstances)Blue

　　細胞核(Nuclei)Red

　　背景(Background)Pink

　　本試劑盒染色靈敏度高，背景低，著色清晰分明，用于小鼠小腸組織染色效果參考圖1。

　　本試劑盒C0153S和C0153M用于切片的染色，每個切片樣品各使用100μl染色液，可以分別進行100次和500次染色。

　　包裝清單：

　　產品編號產品名稱包裝

　　C0153S-1阿爾新藍染色液(pH1.0)10ml

　　C0153S-2核固紅染色液10ml

　　—說明書1份

　　產品編號產品名稱包裝

　　C0153M-1阿爾新藍染色液(pH1.0)50ml

　　C0153M-2核固紅染色液50ml

　　—說明書1份

　　保存條件：

　　室溫避光保存，一年有效。長期不使用可以4℃或-20℃保存。

　　注意事項：

　　第一次使用本試劑盒時建議先取1-2個樣品進行預實驗，摸索染色適宜的條件。

　　染色過程應在濕盒中進行，防止染液風干。

　　核固紅復染的過程推薦淺染，通常能夠分辨細胞核即可，顏色過深有可能影響細胞觀察。

　　應根據不同的組織類型選取pH1.0或pH2.5的阿爾新藍-核固紅染色試劑盒;對于不同的組織，染色時間也不相同。

　　本試劑盒中的阿爾新藍染色液已配制在酸性溶液中，無須再進行額外的酸化處理。

　　如果阿爾新藍染色液出現沉淀，請勿使用。

　　誤放入冰箱等低溫條件下，核固紅染色液會出現析出物。此時可以25-50℃水浴加熱，充分溶解并混勻后使用。

　　本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。

　　為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

　　1.樣品處理：

　　a.對于石蠟切片。

　　石蠟切片的制備：按照常規方法進行取材、固定、洗滌、脫水、透明、浸蠟、包埋、切片、烘片等步驟制備石蠟切片。

　　二甲苯中脫蠟5-10分鐘。

　　換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘。

　　無水乙醇5分鐘。

　　90%乙醇2分鐘。

　　80%乙醇2分鐘。

　　70%乙醇2分鐘。

　　b.對于冰凍切片：

　　冰凍切片的制備：按照常規方法進行取材、速凍、切片、烘片等步驟制備冰凍切片。

　　蒸餾水洗滌2分鐘。

　　c.對于血涂片、骨髓涂片：

　　晾干即可。

　　2.阿爾新藍染色液染色。

　　a.對于石蠟切片和冰凍切片：

　　(a)每個切片滴加50-100μl阿爾新藍染色液(pH1.0)，置于濕盒中染色1小時，去除染液。蒸餾水洗滌3次，每次10秒。

　　(b)每個切片滴加50-100µl核固紅染色液，染色5-10分鐘，去除染液，自來水洗滌5分鐘。

　　(c)切片依次浸入70%乙醇10秒，80%乙醇10秒，90%乙醇10秒，無水乙醇10秒，然后使用二甲苯透明1分鐘，中性樹脂封片。

　　(d)在顯微鏡下觀察和拍照。

　　b.對于血涂片、骨髓涂片：

　　(a)每個切片滴加50-100μl阿爾新藍染色液(pH1.0)，置于濕盒中染色1小時，去除染液。蒸餾水洗滌3次，每次10秒。

　　(b)每個切片滴加50-100µl核固紅染色液，染色5-10分鐘，去除染液，自來水洗滌5分鐘。

　　(c)晾干后在顯微鏡下觀察和拍照。

　　注：染色過深或過淺應調整染色時間。

　　改良吉姆薩染色液上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品，勵志研發和銷售的綜合性生物公司，產品遠銷多個國家和地區，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發高質量的新產品，提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。古朵試劑盒