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FDA水解酶試劑盒-微量法

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50T 19元 99盒可售

100T 1元 99盒可售

更新時(shí)間:2022-04-04 22:47:29瀏覽次數(shù):251次

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規(guī)格 50T/100T 儀器 分光光光度計(jì)/酶標(biāo)儀
運(yùn)輸 常溫 保質(zhì)期 三個(gè)月
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FDA水解酶試劑盒-微量法
FDA是一種無(wú)色化合物,在介質(zhì)中能被許多土壤酶所催化水解,并經(jīng)脫水反應(yīng),產(chǎn)生酶解終產(chǎn)物熒光素,穩(wěn)定不易被分解,并在490nm處有強(qiáng)吸收峰,通過(guò)檢測(cè)490nm處的吸光值變化可計(jì)算得FDA水解酶活性。

FDA水解酶試劑盒-微量法注意:正式測(cè)定前務(wù)必取2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

產(chǎn)品內(nèi)容:

標(biāo)準(zhǔn)液:液體4mL×1瓶,4℃保存。 

試劑一:液體40mL×1瓶,4℃保存。 

試劑二:粉劑1瓶,-20℃避光保存,臨用前加4mL試劑三溶解。 

試劑三:液體40mL×1瓶,4℃保存。

FDA水解酶試劑盒-微量法產(chǎn)品說(shuō)明:

FDA水解反應(yīng)能很好的反應(yīng)土壤中微生物活性和土壤質(zhì)量的變化以及生態(tài)系統(tǒng)中有機(jī)質(zhì)的轉(zhuǎn)化,是土壤質(zhì)量研究中的重要生物學(xué)指標(biāo)之一。

FDA是一種無(wú)色化合物,在介質(zhì)中能被許多土壤酶所催化水解,并經(jīng)脫水反應(yīng),產(chǎn)生酶解終產(chǎn)物熒光素,穩(wěn)定不易被分解,并在490nm處有強(qiáng)吸收峰,通過(guò)檢測(cè)490nm處的吸光值變化可計(jì)算得FDA水解酶活性。

需自備的儀器和用品:

天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

FDA水解酶試劑盒-微量法操作步驟:

一、樣本處理 

稱取風(fēng)干過(guò)20目篩土壤約0.05g,備用。

二、測(cè)定操作表


空白管

標(biāo)準(zhǔn)管

對(duì)照管

測(cè)定管

樣本(g)



0.05

0.05

標(biāo)準(zhǔn)液(μL)


40



雙蒸水(μL)

40




試劑一(μL)

200

200

240

200

試劑二(μL)




40

充分混勻,30℃,震蕩1h

試劑三(μL)

160

160

160

160

10000g,25℃,離心5min,取200μL上清于微量石英比色皿/96孔板中測(cè)定490nm處吸光值A(chǔ),△A1=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管,△A2=A測(cè)定管-A對(duì)照管

注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。

三、酶活性計(jì)算公式

a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

酶活性定義:每克土壤每天產(chǎn)生1μmol熒光素的量為一個(gè)酶活力單位。 

FDA活性(μmol/d/g)=(△A2÷△A1×C標(biāo)準(zhǔn)品)×V反總÷W 

= 2.4×(△A2÷△A1)÷W

b.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

酶活性定義:每克土壤每天產(chǎn)生1μmol熒光素的量為一個(gè)酶活力單位。 

FDA活性(μmol/d/g)=(△A2÷△A1×C標(biāo)準(zhǔn)品)×V反總÷W 

= 2.4×(△A2÷△A1)÷W 

C標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品濃度100μmol/L;V反總:反應(yīng)總體積,0.4mL;W:樣本質(zhì)量,g 

FDA水解酶試劑盒-微量法注意事項(xiàng):

1.盡量采用新鮮土樣或者短期低溫保存樣品,否則很難準(zhǔn)確反映酶的活性。 

2.測(cè)定之前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),若吸光值較高,請(qǐng)進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂屧贉y(cè)定,并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。 


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