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所在地區(qū):上海上海市

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人白介素-7(IL-7)ELISA試劑盒宣傳資料

閱讀:151發(fā)布時間:2015-01-09

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人白介素-7(IL-7)ELISA試劑盒組成(2-8℃保存)

酶標板(Coated Wells)

96孔

酶標抗體工作液(Enzyme Conjugate)

12ml

10×標本稀釋液(Sample Buffer)

12ml

20×濃縮洗滌液(Wash Buffer)

50ml

標準品(Standards):2ng/瓶

2瓶

底物工作液(TMB Solution)

12ml

*抗體工作液(Biotinylated Antibody)

12ml

終止液(Stop Solution)

12ml

準備試劑與收集血樣

1.          收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20 ℃或-70 ℃)保存,避免反復(fù)凍融。

2.          標準品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成2000pg/ml的溶液。設(shè)標準管8管,每管加入標本稀釋液200ul。在*管中加入2000pg/ml的標準品溶液200ul混勻后用加樣器吸出200ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出200ul棄去。第八管為空白對照。

3.          10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。

4.         洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)

人白介素-7(IL-7)ELISA試劑盒檢測程序

1.          加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。

2.          洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。

3.          每孔中加入*抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。

4.          洗板:同前。

5.          每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。

6.          洗板:同前。

7.          每孔加入底物工作液100ul,置37 ℃暗處反應(yīng)15分鐘。

8.          每孔加入100ul終止液混勻。

9.          30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。

結(jié)果計算與判斷

1.          所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。

2.          以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0 pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。

3.          根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)IL-7含量。

人白介素-7(IL-7)ELISA試劑盒性能

             1.   靈敏度:zui小的IL-7 檢測濃度小于15pg/ml。

2.        特異性:可同時檢測重組或天然的人IL-7。不與人其它細胞因子有交叉反應(yīng)。

3.        重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%


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