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在實驗開始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20分鐘以上后,再進行測定,以使ELISA試劑盒在使用前與室溫平衡。這樣做的目的,主要是為了在后面的溫育反應步驟中,能使反應微孔內(nèi)的溫度能較快地達到所要求的高度,以滿足測定要求。其次,,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應物,從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應用中,通過不同的設計,具體的方法步驟可有多種。
即:用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA試劑盒雙抗體夾心法及ELISA試劑盒間接法。
ELISA試劑盒使用應注意以下幾點:
1 洗板前,應檢查洗液瓶、蒸餾水瓶是否充足,廢液瓶是否滿瓶。
2 在自檢過程中注意觀察洗液灌注是否通暢,排液是否通暢。
3在洗板過程中,應注意觀察反應孔每孔是否灌滿且無外溢,每孔吸水是否吸盡,并且要保證洗液在孔中放置的時間。如果手工洗板的話就更需要操作者的操作技巧。
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