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核糖體蛋白S6激酶1抗體實驗步驟(建議方案)

時間:2022/4/12閱讀:319
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核糖體蛋白S6激酶1抗體實驗步驟(建議方案):


1、石蠟切片,常規脫蠟至水


2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復,在此步驟后進行)。


3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內源性過氧物酶活性。


4、滴加試劑A(藍色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。


5、滴加適當比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。


6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。


7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。


8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。


9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。


10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。


11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)


12、自來水充分沖洗。


13、如果需要,可進行復染,脫水,透明。


14、選擇適當的封片劑封片。


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