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細胞在體外生長期間,通常分為三個階段:潛伏期、指數生長期和平臺期。
潛伏期通常是細胞剛剛傳代,此時細胞開始貼附基質和伸展骨架,代謝活動集中在粘附蛋白和骨架蛋白的表達,細胞數量在這段時間內幾乎沒有增加。
隨后,細胞開始指數生長期,轉錄翻譯過程旺盛,胞內物質、信號傳遞迅速,細胞數量迅速增長。如果在這個時期凍存,實際上是強行將細胞凍結在代謝的某一時刻,勢必造成對解旋的DNA、轉錄翻譯中的RNA和蛋白的機械損傷,增加個別環節發生錯誤的風險。
隨著細胞數量的增長,培養容器內,細胞匯合達到90%以上。大部分細胞因為“接觸抑制"而停止高速代謝和增殖,胞內活動趨于平緩。所以,建議在剛剛進入平臺期時凍存細胞,既可以獲得足量的細胞,也不會對細胞造成過多的機械損傷。
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