您好, 歡迎來到智慧城市網(wǎng)！ 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
您好, 歡迎來到智慧城市網(wǎng)！ 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
13524666654
當(dāng)前位置：上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>逆轉(zhuǎn)錄PCR需延伸時(shí)間解析
用PCR儀擴(kuò)增時(shí)，變性-退火-延伸循環(huán)完成后，繼續(xù)72度延伸了10分鐘的原因：
1、延伸時(shí)間取決于待擴(kuò)增DNA片段的長(zhǎng)度，當(dāng)然是在反應(yīng)體系一定的條件下。例如，使用TaqDNA聚合酶，72度時(shí)的堿基摻入率為35-100bp/s，因此延伸速率為1kb/min。
2、根據(jù)延伸速率推得，擴(kuò)增1kb以內(nèi)的DNA片段1min即可，而3-4kb則需要3-4min，依次照推。通常在最后一輪要適當(dāng)?shù)膶⒀由鞎r(shí)間延長(zhǎng)至4-10min，這樣做是使PCR反應(yīng)全以提高擴(kuò)增產(chǎn)量。
3、繼續(xù)72度延伸了10分鐘除了可以使PCR反應(yīng)全以提高擴(kuò)增產(chǎn)量外，還有一個(gè)作用是：在用普通Taq酶進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)在產(chǎn)物末端加A尾的作用，可以直接用于TA克隆的進(jìn)行。
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé)，智慧城市網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示：為規(guī)避購(gòu)買風(fēng)險(xiǎn)，建議您在購(gòu)買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。
