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豬II型肺泡上皮細(xì)胞

參  考  價:5250
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    經(jīng)銷商

  • 所在地

    上海市

規(guī)格

5×105 5250元 15瓶可售

更新時間:2024-04-10 11:22:58瀏覽次數(shù):1859次

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貨號 A01X2253 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
種屬來源 用途 僅供科研實驗
品牌 撫生
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一、細(xì)胞基本屬性

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品規(guī)格

商品貨號

II型肺泡上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

A01X2253

5.jpg

二、使用方法:

客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;

3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);

4)待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。

3. 細(xì)胞收貨脫落

1)收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化;

3)經(jīng)1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi);

4)待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。

5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。

4. 細(xì)胞實驗

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。

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細(xì)胞培養(yǎng)注意事項:

公司產(chǎn)品僅用于科研關(guān)于原代細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項。原代細(xì)胞培養(yǎng)是一項非常重要的實驗技術(shù),掌握好這些注意事項,能讓你的實驗更順利。

首先,無菌操作是關(guān)鍵。一定要保持操作環(huán)境的清潔,避免細(xì)菌或霉菌污染,否則實驗就會失敗。

其次,選擇適合的培養(yǎng)基和血清也很重要。不同細(xì)胞對培養(yǎng)基和血清的需求不同,所以要根據(jù)細(xì)胞類型來選擇合適的培養(yǎng)基和血清。

另外,也是細(xì)胞培養(yǎng)中的成分。要新鮮配制,在貯存過程中也要定期補充。

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,靜置培養(yǎng)也是非常重要的。細(xì)胞在消化分離后需要一定的時間來適應(yīng)新環(huán)境,所以在這段時間內(nèi)要避免頻繁取出培養(yǎng)瓶觀察。

此外,消化時間也要控制得當(dāng)。通常消化至肉眼可見微小組織顆粒即可,過長的消化時間會導(dǎo)致細(xì)胞損傷加重,影響細(xì)胞培養(yǎng)成活率。

最后,對于一些特殊類型的細(xì)胞,可能需要添加一些特殊的生長因子來促進細(xì)胞生長和增殖。但需要注意的是,這些生長因子的費用通常較高。

 


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