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進(jìn)行ELISA試劑盒各項實驗條件的選擇包括

閱讀:283發(fā)布時間:2017-8-14

進(jìn)行ELISA試劑盒各項實驗條件的選擇包括

1 固相載體的選擇:不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選,用等量抗原包被,在同一實驗條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
2 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間,吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時,
3 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份),然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
4 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。


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