對稱二甲基*(SMDA)ELISA檢測試劑盒說明書
本試劑僅供研究使用 標本：體液
對稱二甲基*(SMDA)ELISA檢測試劑盒試驗原理：
BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將BFGF和*標記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA 檢測試劑盒洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關系。
對稱二甲基*(SMDA)ELISA檢測試劑盒自備材料
1．蒸餾水。
2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3．振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2．實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
對稱二甲基*(SMDA)ELISA檢測試劑盒操作注意事項
1．試劑應按標簽儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
2．實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
3．不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6．洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7．底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8．加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9．按照中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
對稱二甲基*(SMDA)ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準備
標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。
2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。
對稱二甲基*(SMDA)ELISA檢測試劑盒操作步驟
1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。
2．根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。
3．加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
4．甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6．甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8．取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。
9．在450nm波長處測定各孔的OD值。
局限
6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到的結果。
對稱二甲基*(SMDA)ELISA檢測試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細胞因子反應。
3. 重復性：板內、板間變異系數均小于10%。
對稱二甲基*(SMDA)ELISA檢測試劑盒結果判斷與分析
1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的BFGF標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的BFGF含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值范圍：0-800pg/ml
4、敏感度： 1.0 pg/ml
分子名稱 產品類型 種屬 產品描述
EGFR Protein Human 重組人 EGFR / HER1 / ErbB1 (aa 668-1210) 蛋白 (His & GST 標簽)
MAPK13 Protein Human 重組人 p38 delta / MAPK13 蛋白 (Activated in vitro, GST 標簽)
MAPK14 Protein Human 重組人 p38 alpha / MAPK14 蛋白 (Activated in vitro, His 標簽)
SPHK1 Protein Human 重組人 SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 蛋白
PTPRC Protein Mouse 重組小鼠 CD45 / PTPRC 蛋白 (aa 453-1152)
ROR1 Protein Human 重組人 ROR1 蛋白 (aa 453-783, His & GST 標簽)
AKT3 Protein Mouse 重組小鼠 AKT3 蛋白 (aa 106-479)
PTK6 Protein Mouse 重組小鼠 PTK6 / Brk 蛋白 (His & GST 標簽)
TGFBR1 Protein Human 重組人 TGFBR1 / ALK-5 / SKR4 蛋白 (aa 200-503, His & GST 標簽)
PTPRC Protein Mouse 重組小鼠 CD45 / PTPRC 蛋白 (aa 453-1152, His & GST 標簽)
EPHA2 Protein Human 重組人 EphA2 蛋白 (aa 585-976, His & GST 標簽)
EPHB3 Protein Human 重組人 EphB3 / HEK2 蛋白 (aa 585-998, His & GST 標簽)
EPHB1 Protein Human 重組人 EphB1 / EPHT2 蛋白 (aa 565-984, His & GST 標簽)
EPHB2 Protein Human 重組人 EphB2 / Hek5 蛋白 (aa 570-987, His & GST 標簽)
EPHB4 Protein Human 重組人 EphB4 / HTK 蛋白 (aa 563-987, His & GST 標簽)
PDGFRA Protein Human 重組人 PDGFRa / CD140a 蛋白 (His & GST 標簽)
EPHA4 Protein Human 重組人 EphA4 / HEK8 蛋白 (aa 570-986, His & GST 標簽)
DDR1 Protein Human 重組人 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (aa 444-913, His & GST 標簽)
