ELISA試劑盒單克隆抗體制備時很多朋友會遇到這樣的問題，即我們免疫用的蛋白為原核表達蛋白而目的蛋白是真核蛋白或病毒等，因為沒有標準品我們做出來的抗體沒有辦法用標準品來驗證是否與其發(fā)生反應(yīng)，zui終導(dǎo)致我們做出的是無用抗體。以下內(nèi)容為我公司實驗室技術(shù)總結(jié)的幾種方法供大家參考，希望對大家有所幫助。
一、若要檢測的抗原為某種新的病毒
ELISA試劑盒方法：1、大量做出該病毒某個蛋白的單克隆抗體；
2、大量采集該病毒疑似感染動物或人血液，用PCR的方法進一步確定每份血液是否真的有該病毒存在；
3、將你做出的大量抗體中的一個做標記作為標記抗體，其他所有抗體作為包被抗體，檢測第二步中確定陽性的血清，結(jié)果與陰性血清做對比，并畫出點狀分布圖。若陽性血清大部分的點在陰性血清之上恭喜你找到配對抗體了；若結(jié)果相差不大，請重新標記一株抗體做相同實驗。
二、若要檢測抗原為某一細胞因子
ELISA試劑盒方法：1、通過超表達的方法建立穩(wěn)定表達的細胞系，注意要在目的蛋白上加相應(yīng)的標簽，以便純化。若僅僅是找到配對抗體則不需要純化甚至不需要建立穩(wěn)定表達的細胞系瞬時轉(zhuǎn)染就可實現(xiàn)，若要進一步作出標準曲線請純化。
2、 將細胞系建立后，我們就可以拿到標準品了，做配對工作就相應(yīng)簡單。
3、若該種細胞因子可有某種陽性刺激物大量刺激而來，也可不做細胞系。用陽性刺激物刺激，我們細胞刺激物的上清液來做標準品也可。
ABI1 ABI1/SSH3BP1蛋白抗體
Acetyl-Histone H1.4 (K53) 乙酰化組蛋白H1b抗體
phospho-Androgen Receptor (Ser578) 磷酸化雄激素受體抗體
APE1 多功能DNA修復(fù)酶抗體
AAK1 AP2關(guān)聯(lián)激酶1抗體
AQP1 水通道蛋白1抗體
AATK AATK細胞凋亡關(guān)聯(lián)*激酶抗體
ABCB5 ATP結(jié)合蛋白家族5抗體
APNG N-甲基嘌呤DNA糖基化酶
Artemin Artemin抗體
ADRA1A alpha 1腎上腺素能受體A抗體
Angiotensin II Type 1 Receptor 血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體
ATF3 活化轉(zhuǎn)錄因子3抗體
APJ Receptor 血管緊縮素樣蛋白1抗體
APG7 自噬相關(guān)蛋白7抗體
ANTXR2 炭疽毒素受體2抗體
ATG4C 自噬相關(guān)蛋白4C抗體
ELISA試劑盒
