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上海撫生實業有限公司
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閱讀:307發布時間:2014-11-3
研究組通過ELISA試劑盒實驗探討體外條件下分離、純化小鼠骨髓間充質干細胞的有效方法,對所獲細胞進行培養,觀察細胞的生物學特性。
此方法實驗由實驗室的王教授負責進行。ELISA試劑盒首先采用密度梯度離心法分離小鼠骨髓間充質干細胞,用貼壁培養法對所獲細胞進行培養、傳代、純化和擴增,觀察細胞的生物學特性,倒置相差顯微鏡觀察細胞的形態學特征,透射電鏡觀察細胞的超微結構,流式細胞術鑒定細胞表面標志物;將分離純化的小鼠骨髓間充質干細胞培養于Ⅰ型膠原蛋白上面,對細胞的堿性磷酸酶表達、細胞礦化形成鈣化結節的能力進行測定。 結果分離的細胞1天后*貼壁,貼壁的細胞平均10d后形成細胞克隆,所獲細胞形態均一,呈成纖維細胞樣生長,ELISA試劑盒細胞穩定表達骨髓間充質干細胞表面標志物。
結論密度梯度離心法分離,貼壁培養法培養所得細胞,可以有效分離、純化小鼠骨髓間充質干細胞。用此種方法獲得的細胞具有骨髓間充質干細胞的特性。ELISA試劑盒Ⅰ型膠原蛋白能夠促進小鼠骨髓間充質干細胞的成骨分化。
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