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中國酶聯免疫試劑盒銷售平臺


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*輕鏈kappa抗體ELISA試劑盒操作方法

閱讀:204發布時間:2014-03-26

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    中國酶聯免疫試劑盒銷售平臺

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使用目的:

本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中免疫球蛋白輕鏈kappa抗體(κ-IgLC)含量

操作步驟

  1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

48pg/ml

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

24pg/ml

4號標準品

150μl5號標準品加入150μl標準品稀釋液

12pg/ml

3號標準品

150μl4號標準品加入150μl標準品稀釋液

6pg/ml

2號標準品

150μl3號標準品加入150μl標準品稀釋液

3pg/ml

1號標準品

150μl2號標準品加入150μl標準品稀釋液

 

  1. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
  2. 溫育:用封板膜封板后置37溫育30分鐘。  
  3. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
  4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
  5. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
  6. 溫育:操作同3
  7. 洗滌:操作同5
  8. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37避光顯色15分鐘.
  9. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
  10. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

注意事項

1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

  1. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
  2. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。


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