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技術(shù)文章

ELISA試劑盒的方法測抗原

閱讀:244發(fā)布時間:2015-8-10

    根據(jù)試劑的來源和樣本的情況以及檢測的具體條件,可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。ELISA試劑盒以下主要介紹幾種公司常用的檢測抗原的類型:

    樣本中的待測藥物和固相化的抗原共同競爭一定量的抗體,加入酶標記抗抗體(酶標二抗)后能與固相化的抗原抗體復(fù)合物特異性結(jié)合,經(jīng)底物顯色后檢測,樣本中藥物含量愈高,競爭結(jié)合的抗體量愈多,從而結(jié)合在固相上的酶標記抗抗體(酶標二抗)量愈少,zui后的顯色也愈淺。本公司及國內(nèi)產(chǎn)品多用此法。

具體操作步驟如下:

1)抗原固相化:將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗原,洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。

2)加入標準品/樣本,再加入抗體,保溫反應(yīng)。ELISA試劑盒樣本中藥物與固相抗原同時競爭與特異性抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去游離物質(zhì)及吸附在固相載體上結(jié)合不緊密的物質(zhì)。
3)加酶標抗抗體,固相免疫復(fù)合物中的抗體與酶標抗體抗體結(jié)合,從而間接地標記上酶。洗滌后,固相載體上的酶量與樣本中受檢藥物的量負相關(guān)。
4)加底物顯色,固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。
ELISA試劑盒通過儀器檢測分析,測知樣本中抗原的量。


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