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人胎盤生長因子(PLGF)ELISA試劑盒實驗操作步驟

閱讀:261發布時間:2014-5-19

人胎盤生長因子(PLGF)ELISA試劑盒    Human placenta growth factor,PLGF ELISA Kit     ,規格:96T/48T,產品別名:    人胎盤生長因子(PLGF)檢測試劑盒
人胎盤生長因子(PLGF)ELISA試劑盒原理的簡要說明書:胎盤生長因子(PlGF),是血管內皮生長因子家族中的一員,PlGF通過特異性地結合于VEGFR21/Flt21 而產生生物學活性。PlGF的分子結構為糖蛋白同型二聚體分子,其蛋白氨基酸序列與VEGF有46%的同源性。通過mRNA的選擇性拼接PlGF可產生不同的蛋白亞型: PlGF21, PlGF22, PlGF23。PlGF22 與其他兩個亞型不同,它包含一個21 個堿性氨基酸的區域,與VEGF22 一樣具有肝素結合活性。            
人胎盤生長因子(PLGF)ELISA試劑盒實驗操作步驟
1.取出酶標板,設空白孔,依照次序對應分別加入100μl的標準品于空白微孔中(空白孔視為0號標準品,用醫用蒸餾水替代)
2、分別標記樣品編號,加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中(不同的樣本采用不同的吸頭)。
3、將酶標板置于37℃溫育30分鐘;
4、將酶標板板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應用洗滌液后,立即甩去液體;
5、每個孔中加滿應用洗滌液后,輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標板拍干。
6、重復第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標板拍干。
7、在標準品孔和樣品孔中加入100μl的酶標偶合溶液。
8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。
9、將酶標板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應用洗滌液后,立即甩去液體。
10、每個孔中再次加滿洗滌應用液后,室溫輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標板拍干。
11、重復第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標板拍干。
12、在每個孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。(A液、B液采用不同的吸頭加樣)
13、將酶標板置于37℃避光溫育反應15分鐘。
14、每個微孔中加入50μl的終止液,輕輕振蕩混勻。
15、在酶標儀上,450nm處測定OD; 顯色后,15分鐘內進行測定。
16、根據制備的標準曲線,計算樣本含量


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