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技術文章

牛小反芻獸疫抗體(PPR Ab)Elisa試劑盒

閱讀:268發布時間:2014-12-10

牛小反芻獸疫抗體(PPR Ab)Elisa試劑盒試劑盒組成
1  30 倍濃縮洗滌液  20ml×1 瓶  7  終止液  6ml×1 瓶 
2  酶標試劑  6ml×1 瓶  8  標準品(240pg/ml)  0.5ml×1 瓶 
3  酶標包被板  12 孔×8 條  9  標準品稀釋液  1.5ml×1 瓶 
4  樣品稀釋液  6ml×1 瓶  10  說明書  1 份 
5  顯色劑A 液  6ml×1 瓶  11  封板膜  2 張    
6  顯色劑 B液  6ml×1/瓶  12  密封袋 1 個 

牛小反芻獸疫抗體(PPR Ab)Elisa試劑盒操作步驟
1.  標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。 
120pg/ml  5 號標準品 150µl的原倍標準品加入 150µl標準品稀釋液 
60pg/ml  4 號標準品 150µl的5 號標準品加入 150µl標準品稀釋液 
30pg/ml  3 號標準品 150µl的4 號標準品加入 150µl標準品稀釋液 
15pg/ml  2 號標準品 150µl的3 號標準品加入 150µl標準品稀釋液 
7.5pg/ml  1 號標準品 150µl的2 號標準品加入 150µl標準品稀釋液 
2.  加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl, 
然后再加待測樣品 10µl(樣品zui終稀釋度為 5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡
量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。 
3.  溫育:用封板膜封板后置37℃溫育 30 分鐘。    
4.  配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用 
5.  洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此
重復 5次,拍干。 
6.  加酶:每孔加入酶標試劑50µl,空白孔除外。  
7.  溫育:操作同 3。 
8.  洗滌:操作同 5。 
9.  顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
10 分鐘. 
10.  終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。 
11.  測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止
液后 15 分鐘以內進行。

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