
2023年06月16日 14:38上海古朵生物科技有限公司點擊量:595
【古朵生物】ELISA試劑盒的操作方法、注意事項和優勢
ELISA Kit通稱為ELISA試劑盒、酶聯免疫吸附檢測試劑盒,是一種靈敏度高,特異性強,重復性好的實驗方法,且因其試劑穩定,易保存,耗時短,操作簡便,結果判斷客觀等優點,已被廣泛應用于免疫學檢驗的各領域中,得到科研工作者的認可。
ELISA是一種廣泛應用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術。酶聯免疫吸附試驗的標準程序,通常是把蛋白、抗體、或激素等(即抗原)直接或是以捕捉抗體(capture Ab)固定在固相載體上,再加入一級檢測抗體(primarydetection Ab),形成一個抗原抗體的復合物。如果該抗體已經用酶(enzyme)標記了,即可用來直接測定抗原的量,若無,則可利用另一個酶標記的二級抗體來測定抗原的量。測定抗原量的方法是加入該酶的底質(substrate),作用后產生出現的顏色深淺和樣本中的抗原量呈正比的關系,依此原理計算出樣本中的抗原總量或濃度。
產品優勢:
1.采用高效、靈敏、特異的抗體。
2.易保存、耗時短、操作簡便、性價比高。
3.穩定的重復性和可靠性,線性范圍好。
4.吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體。
5.適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等多種標本類型。
ELISA試劑盒操作方法:
1.標準品的稀釋,請按照說明書進行操作。
2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
3.加樣:不規范的移液操作可能帶來誤差。
1)空白孔,空白對照孔不加樣品,sws標記的抗體,鏈霉親和素-HRP,只加顯色劑A&B和終止液,其余各步操作相同;
2)標準品孔:加入標準品50ul,鏈霉親和素-HRP50ul(標準品中已事先整合好抗體,故不加);
3)待測樣品孔:加入樣本40ul,然后各加入抗NE抗體10ul、鏈霉親和素-HRP50ul,蓋上封板膜,輕輕震蕩混勻,37℃溫育60分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.顯色:每孔先加入顯色劑A50ul,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
7.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
8.測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后10分鐘以內進行。
9.根據標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線的回歸方程,再根據樣品的OD值在回歸方程上計算出對應的樣品濃度。也可以使用各種應用軟件來計算。
10.僅供參考,以試劑盒內實際說明書為準。
Elisa試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品,勵志研發和銷售的綜合性生物公司,產品遠銷多個國家和地區,我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向,不斷開發高質量的新產品,提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。
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