水土中總磷酸鹽試劑盒-微量法注意：正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義
總磷酸鹽包含正磷酸鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、多聚磷酸鹽等各種磷酸鹽的形式，反應(yīng)了水土中的磷酸鹽水平，是一個水質(zhì)和土壤質(zhì)量評價的重要指標(biāo)。
測定原理
在酸性溶液中，在分解劑和高溫條件下，將無機(jī)磷酸鹽和有機(jī)磷酸鹽水解成正磷酸鹽，正磷酸鹽可與鉬酸銨反應(yīng)成磷鉬酸，在還原劑存在時被還原為磷鉬藍(lán)，在 710nm 處有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品
天平，震蕩儀、常溫離心機(jī)、酶標(biāo)儀、96 孔板、蒸餾水。
水土中總磷酸鹽試劑盒-微量法試劑組成和配制
試劑一：液體 20mL×1 瓶，4℃保存。 試劑二：液體 40mL×1 瓶，4℃保存。 試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑四：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加 4mL 蒸餾水充分溶解，然后將試劑五全部加入試劑四中充分混勻。
試劑五：液體×1 支，4℃保存。
樣品處理
1.水樣：按照水樣體積（mL）：試劑一體積（mL）：試劑二體積（mL）為 10:1:2 的比例
（建議取 1mL 水樣，加入 100μL 試劑一和 200μL 試劑二）95℃沸水浴 30min，冷卻后待測。
2.土樣：按照土壤質(zhì)量（g）：蒸餾水體積(mL)：試劑一體積（V）：試劑二體積（V）=1： 10:1:2（建議稱取約 0.1g 土樣，加入 1mL 蒸餾水，再加入 100μL 試劑一和 200μL 試劑二）， 95℃沸水浴振蕩 30min，10000g ，25℃離心 10min，取上清液待測。
水土中總磷酸鹽試劑盒-微量法測定操作表
空白管 | 測定管 | |
樣本（μL） | 40 | |
試劑三（μL） | 40 | 40 |
試劑四（μL） | 40 | 40 |
蒸餾水（μL） | 120 | 80 |
充分混勻，25℃靜置 10min，于 96 孔板測定 710 處吸光值 A，分別 記為A 空白管和A 測定管，△A=A 測定管-A 空白管 | ||
計算公式
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.0237x + 0.0016，R2 = 0.9989；x 為 PO -濃度 μg/mL，y 為吸光值△A。
1.水樣：
總磷酸鹽含量（μg/mL）= (△A-0.0016)÷ 0.0237×V 樣÷（V 樣÷V 樣總）
= 54.8×(△A-0.0016)
2.土樣：
總磷酸鹽含量（μg/g）= (△A+0.0063)÷ 0.0489×V 樣÷（W×V 樣÷V 樣總）
=54.8×(△A+0.0063)÷W
V 樣：加入樣本體積；0.04mL；V 樣總：樣本總體積，1.3mL；W，土樣質(zhì)量，g。水土中總磷酸鹽試劑盒-微量法
