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遠慕生物:細胞劃痕實驗
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細胞劃痕實驗是一種簡單易行的檢測細胞運動的方法,實驗成本低,可以用來檢測貼壁生長腫瘤細胞的侵襲轉移能力。
實驗材料細胞樣品
試劑、試劑盒無血清培養基PBS
儀器、耗材6孔板marker筆直尺槍頭
抗體Hamster IgG3, λ抗體
Hamster IgG3, λ抗體
Hamster IgG3, λ抗體
實驗步驟
一.準備:
所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺內)
二.流程:
1.先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻得劃橫線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。
2.在空中加入約5X105個細胞,具體數量因細胞不同而不同,掌握為過夜能鋪滿。
3.第二天用槍頭比著直尺,盡量垂至于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不能傾斜。
4.用PBS洗細胞3次,去處劃下的細胞,加入無血清培養基。
5.放入37度5%CO2培養箱,培養。按0,6,12,24小時取樣,拍照。
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