染色體顯帶技術
實驗目的:
了解染色體顯帶技術的發展與基本知識;
掌握染色體C帶技術。
實驗原理:
所謂染色體顯帶技術指借助特殊的處理后,再用染料對染色體進行分化染色,使其呈現特定帶紋的一種細胞遺傳學技術。如C帶、G帶等。顯帶處理后,染色體上帶紋的數目、位置、寬窄與染色的深淺具有相對的穩定性與一定的種屬特異性。它為不同物種之間的進化關系的研究提供了一個有效手段。C帶是特異的顯示結構異染色質的帶,它專一地顯示著絲粒區域的結構異染色質。
染色體顯帶技術 實驗材料:實驗五與實驗二制備的染色體玻片標本若干片
器具及藥品:顯微鏡,電子天平,恒溫水浴鍋,玻片架,解剖器,染色缸,白瓷板,氫氧化鋇, 化鈉,檸檬酸鈉,吉姆薩,磷酸緩沖液。
實驗步驟:BSG法顯示C帶
將3-7天的實驗5染色體制片放入0.2mol/l的鹽酸中處理1小時。蒸餾水沖洗后,轉入50℃的5%的氫氧化鋇溶液中5-15分鐘。時間由經驗得來。
同溫蒸餾水沖洗,直至氫氧化鋇沖凈為止,如果沖不凈,可放入0.2mol/l的鹽酸中2秒鐘,再用蒸餾水沖洗干凈,晾干。或連同染色缸放在自來水下沖洗,直至氫氧化鋇溶液沖洗干凈,因鋇遇空氣易形成不溶于水的碳酸鋇膜,污染制片,使染色體無法顯帶。換入蒸餾水,每隔4-5分鐘換水一次,重復3次左右。
轉入60℃的2×SSC溶液中恒溫水浴1小時,同溫蒸餾水沖洗,自然干燥。
染色體顯帶技術 染色:10%Giemsa液(PH=6.8)扣染1hr,蒸餾水沖洗。
鏡檢
拍照
HSG法顯示C帶:將3-7天的實驗5染色體制片放入0.2mol/l的鹽酸中處理1小時。蒸餾水沖洗后,轉入60℃的2×SSC溶液中恒溫水浴1小時,同溫蒸餾水沖洗,自然干燥。
染色:10%Giemsa液(PH=6.8)扣染1hr,蒸餾水沖洗。
鏡檢
拍照