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如何在 DNA(和 RNA)組合在一起后通過原位雜交來檢測(cè)它?接下來一起看看原位雜交:基因檢測(cè)的演變,從 Nanogold® 到 EnzMet™。
艾美捷 Nanoprobes 關(guān)于Nanogold®原位雜交的文章最近非常火,緊接著,一種強(qiáng)大的原位雜交新技術(shù):EnzMet ™誕生了。
Nanoprobes的原位雜交技術(shù)都有自己的應(yīng)用范圍;在這里收集了一些資源來幫助用戶選擇適合的研究領(lǐng)域的方法。
Human Pathology的專題文章討論了多種原位雜交檢測(cè)方法的發(fā)展、特點(diǎn)和比較優(yōu)點(diǎn),包括:
1.Nanogold® 銀增強(qiáng)
2.Nanogold® 與金增強(qiáng) (GOLDFISH)
3.EnzMet ™(原名 酶金相)
這些原位雜交方法在開發(fā)用于HER2基因擴(kuò)增的顯色測(cè)定的背景下進(jìn)行了討論;這是乳腺癌中惡性腫瘤行為的重要指標(biāo),也是用于評(píng)估患者接受人源化單克隆抗體治療(赫賽汀)的標(biāo)準(zhǔn)之一。
艾美捷 Nanoprobes 金相原位雜交的演變:
(a)和(b):通過酪胺信號(hào)放大(TSA,也稱為CARD,或催化的報(bào)道分子沉積)檢測(cè)SiHa細(xì)胞中HPV-16的單拷貝,然后用(a)用DAB開發(fā)的鏈霉親和素-過氧化物酶檢測(cè),和(b) streptavidin-Nanogold® 與醋酸銀自動(dòng)金相學(xué)。HPV-16 的副本顯示為單點(diǎn)。(H & E 復(fù)染。原始放大倍數(shù) X 560)。
(c) Nanogold® 與金增強(qiáng) (GOLDFISH) 程序在具有 HER2 基因擴(kuò)增的組織中,顯示來自緊密接近的多個(gè)基因拷貝的大的、匯合的核信號(hào)。核固紅復(fù)染劑(原始放大倍數(shù) 400)。
(d) : EnzMet™ 檢測(cè)石蠟包埋的人類浸潤(rùn)性乳腺癌活檢中單個(gè) HER2 基因拷貝的擴(kuò)增;正常、未擴(kuò)增的細(xì)胞包含 HER2 基因的兩個(gè)拷貝,而浸潤(rùn)性 HER2 擴(kuò)增的癌細(xì)胞顯示多個(gè)拷貝(原始放大倍數(shù) X 400。圖片由克利夫蘭診所基金會(huì)的 RR Tubbs 博士提供)。
文獻(xiàn)參考:
1.Powell, R. D.; Pettay, J. D.; Powell, W. C.; Roche, P. C.; Grogan, T. M.; Hainfeld, J. F., and Tubbs, R. R.: Metallographic in situ hybridization. Hum. Pathol., 38, 1145-1159 (2007).
Abstract and full article available on the Human Pathology website
Institutional access at SciVerse ScienceDirect
2.Tubbs, R. R.; Pettay, J.; Skacel, M.; Downs-Kelly, E.; Powell, R. D.; Hicks, D. G., and Hainfeld, J. F.: Gold and Silver-Facilitated Metallographic In Situ Hybridization Procedures for Detection of HER2 Gene Amplification. In: Molecular Morphology in Human Tissues; Hacker G.W., and Tubbs, R. R. (Eds): CRC Press, Boca Raton, FL. Ch. 5, pp. 101-106 (2005).
Full text available from CRCNetBase (Shibboleth, Athens)
3.Tubbs, R.; Pettay, J.; Hicks, D.; Skacel, M.; Powell, R.; Grogan, T., and Hainfeld, J.: Novel bright field molecular morphology methods for detection of HER2 gene amplification. J. Mol. Histol., 35, 589-594 (2004).
Abstract and full text available from SpringerLink.
Nanoprobes專注于免疫金標(biāo)記和免疫測(cè)定試驗(yàn)領(lǐng)域,為廣大科研機(jī)構(gòu)提供用于檢測(cè)生物分子的靈敏的試劑和技術(shù)。艾美捷科技是Nanoprobes的中國(guó)代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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