2019 03-18

植物總DNA的快速少量抽提實(shí)驗(yàn)步驟

DNA分子是分子生物學(xué)研究的基本材料，依不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康目刹扇〔煌某樘岱椒ǐ@取數(shù)量和質(zhì)量不等的DNA。實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖橇私庵参顳NA抽提的主要方法，掌握CTAB法快速抽提水稻DNA。實(shí)驗(yàn)方法原理CTAB法：...

2019 03-11

3-磷酸甘油醛脫氫酶的測(cè)定實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)方法原理GAPDH，D-磷酸甘油醛；NADP+氧化還原酶（磷酸化）。D-3-磷酸甘油醛＋NAD＋?1，3-磷酸甘油醛＋NADH＋H＋酶的實(shí)驗(yàn)既可以在正反應(yīng)方向也可以在偶聯(lián)后的逆反應(yīng)方向進(jìn)行。正反應(yīng)...

2019 03-07

蛋白質(zhì)沉淀濃縮方法原理及詳細(xì)解析

在生化制備中，沉淀主要用于濃縮目的，或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。在生化制備中常用的有以下幾種沉淀方法和沉淀劑：1．鹽析法多用于各種蛋白質(zhì)和酶的分離純化。2．有機(jī)溶劑沉淀法多用于生物小...

2019 03-04

WB 前傳：你了解你的目的蛋白嗎？

剛開始做Westernblot的同學(xué)們想必都大多都是研究生，雖然科研經(jīng)歷還不是特別豐富，但情感經(jīng)歷一定都比較豐富吧。同學(xué)們想想自己剛談戀愛的時(shí)候，你剛喜歡一個(gè)人卻還沒表白之前，是不是每天都要想盡一切辦...

2019 03-01

去除抗血清中交叉反應(yīng)的抗體實(shí)驗(yàn)方法

去除抗血清中交叉反應(yīng)的抗體實(shí)驗(yàn)：材料：試劑、試劑盒封閉緩沖液封閉試劑抗體LB頂層瓊脂糖LB平板瓊脂培養(yǎng)基儀器、耗材硝酸纖維素濾膜λ噬菌體載體cDNA文庫實(shí)驗(yàn)步驟：緩沖液和溶液將貯存液稀釋到適當(dāng)?shù)臐舛取?..

2019 02-25

古朵生物：什么是無血清培養(yǎng)基？

無血清培養(yǎng)基的定義：無血清培養(yǎng)基(serumfreemedium)：是不需要添加血清就可以維持細(xì)胞在體外較長(zhǎng)時(shí)間生長(zhǎng)繁殖的合成培養(yǎng)基。簡(jiǎn)單地認(rèn)為是體外細(xì)胞培養(yǎng)過程中的細(xì)胞培養(yǎng)基中不含有動(dòng)物或人的血清，...

2019 02-18

血清保存與解凍應(yīng)注意哪些

血清的保存應(yīng)該注意以下幾點(diǎn)：(1)需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃-70℃低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過1個(gè)月.由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體...

2019 02-12

如何解決懸浮細(xì)胞難感染的問題?

一般的懸浮細(xì)胞對(duì)于懸浮細(xì)胞，可采用離心感染方法提高感染效率。如將細(xì)胞培養(yǎng)板密封后，用平角轉(zhuǎn)子離心機(jī)1000g離心1h，再放回培養(yǎng)箱中正常培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞病毒系列產(chǎn)品慢病毒：慢病毒對(duì)分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞均...

2019 01-21

古朵生物：westblot完整版操作規(guī)程

Western印跡法這種技術(shù)是把電泳分離的組分從凝膠轉(zhuǎn)移到一種固相支持體，并以針對(duì)特定氨基酸序列的特異性試劑作為探針檢測(cè)之。Western使用的探針是抗體，它與附著于固相支持體的靶蛋白所呈現(xiàn)的抗原表位...

2019 01-16

分子實(shí)驗(yàn)中常用生化試劑的作用原理匯總

知道原理對(duì)實(shí)驗(yàn)出問題時(shí)分析很有益，所以列出來一起分享！1．溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌體細(xì)胞壁的主要化學(xué)成分肽聚糖中的β-1,4糖苷鍵，因而具有溶菌的作用。當(dāng)溶液中pH小于8時(shí)，溶菌酶作用受到抑制...

2019 01-14

如何選擇合適的細(xì)胞培養(yǎng)基？

近幾年，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)擴(kuò)展到生物學(xué)研究和商業(yè)生產(chǎn)的許多方面，成為廣泛采用的技術(shù)手段，而在細(xì)胞培養(yǎng)發(fā)展歷史中，細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展占有重要的位置。那么對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展以及如何選擇出合適的細(xì)胞培養(yǎng)基...

2019 01-11

土壤DNA 純化難點(diǎn)——腐殖質(zhì)

土壤，是由一層層厚度各異的礦物質(zhì)成分所組成大自然主體。土壤和母質(zhì)層的區(qū)別表現(xiàn)在于形態(tài)、物理特性、化學(xué)特性以及礦物學(xué)特性等方面。由于地殼、水蒸氣、大氣和生物圈的相互作用，土層有別于母質(zhì)層。它是礦物和有機(jī)...

2019 01-07

血藥濃度檢檢測(cè)方法分析

藥物代謝動(dòng)力學(xué)（Pharmacokinetic,PK）是定量研究藥物在生物體內(nèi)吸收、分布、代謝和排泄規(guī)律，并運(yùn)用數(shù)學(xué)原理和方法闡述血藥濃度隨時(shí)間變化規(guī)律的一門學(xué)科。血清中血藥濃度的檢測(cè)在藥代動(dòng)力學(xué)（p...

2019 01-02

古朵生物：常規(guī)切片的制作過程

【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?.了解常規(guī)切片的制作過程。2.熟悉蘇木素－伊紅（hematoxylinａndeosin，HE）染色方法?！緦?shí)驗(yàn)原理】將各種方法（活檢、尸檢）獲取的組織標(biāo)本經(jīng)過一定的步驟處理，做成切片。蘇...

2018 12-26

植物組織培養(yǎng)中愈傷組織的形成和形態(tài)發(fā)生

在植物組織培養(yǎng)中，主要目標(biāo)是誘導(dǎo)愈傷組織形成和形態(tài)發(fā)生，使一個(gè)離體的細(xì)胞、一塊組織或一個(gè)器官的細(xì)胞，通過脫分化形成愈傷組織，并由愈傷組織再分化形成植物體。愈傷組織的形成從一塊外植體形成典型的愈傷組織，...

2018 12-24

古朵：濃度測(cè)定新選擇，助力核酸定量

在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，核酸定量是*的一個(gè)過程，包括初提產(chǎn)物的核酸（gDNA和TotalRNA）質(zhì)控，或者PCR產(chǎn)品和NGS文庫質(zhì)控。目前常見的定量?jī)x器是Nanoｄrop和Qubit，前者只需一兩微升的樣...

2018 12-17

實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 引物設(shè)計(jì)原則

實(shí)時(shí)熒光定量PCR（real-timePCR）技術(shù)和普通PCR相比，準(zhǔn)確性和靈敏度高，速度快，效率高，近年來被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、生物等各個(gè)領(lǐng)域，是進(jìn)行分子生物學(xué)研究*的技術(shù)工具。在科研方面可定量分析各種...

2018 12-13

抗體敲除驗(yàn)證：捍衛(wèi)實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn) 確保抗體特異性

據(jù)估計(jì)，因抗體質(zhì)量不佳，生命科學(xué)領(lǐng)域每年的損失達(dá)到8億美元。這也造成了無數(shù)的實(shí)驗(yàn)失敗，浪費(fèi)了寶貴的資源和科學(xué)家的時(shí)間。盡管科學(xué)界已經(jīng)意識(shí)到這個(gè)問題，但目前仍然缺乏抗體驗(yàn)證的整體框架。為了刺激研究界實(shí)現(xiàn)...

2018 12-10

曲霉菌檢測(cè)：如何防止霉菌性傳染病

（1）流行特點(diǎn)：動(dòng)物曲霉菌病是由曲霉菌屬的曲霉菌引起動(dòng)物的一種以呼吸系統(tǒng)機(jī)能紊亂為特征的霉菌性傳染病。病原主要侵害呼吸系統(tǒng)，有時(shí)在全身各處也形成病灶。通常是因健康動(dòng)物接觸污染的發(fā)霉飼料或墊料而感染。各...

2018 12-04

如何從腦漿組織中提取外泌體√

外泌體是由細(xì)胞內(nèi)多泡體與細(xì)胞膜融合后，釋放到細(xì)胞外的一種直徑約30～150nm的膜性囊泡。幾乎所有的細(xì)胞都會(huì)產(chǎn)生外泌體，被分泌出的外泌體會(huì)進(jìn)入各種體液，通過循環(huán)系統(tǒng)到達(dá)其他細(xì)胞與組織，產(chǎn)生遠(yuǎn)程調(diào)控作用...